“当蛋白-蛋白相互作用、翻译后修饰与超高分辨率成像成为常规实验时,决定成败的往往不是仪器,而是那 50 uL 的填料。”
一、为什么科研级树脂需要“重新被定义”?
传统琼脂糖填料诞生于 1960 年代,其设计初衷是满足毫克级纯化;
而今天的科研场景更关注:
纳克级富集——质谱前处理;
活细胞裂解液一次捕获——避免稀释丢失;
多标签并行 Pull-down——系统生物学;
可逆、温和的洗脱——保留复合物天然构象。
Nanotag 树脂(Resins)系列以单域抗体(sdAb)为配基,将亲和填料的性能边界推向“微量、精准、模块化”,为上述需求提供了系统级解决方案。
二、Nanotag 树脂家族速览
Cat. No. | 名称 | 配基类型 | 场景关键词 |
N0310 / N0315 | GFP Selector | 抗 GFP sdAb | 蛋白定位、CRISPR 报告基因 |
N0410 / N0415 | RFP Selector | 抗 RFP sdAb | 双色成像富集 |
N0510 | TagFP Selector | 广谱荧光蛋白 sdAb | 未知突变体筛选 |
N3210 | mNeonGreen Selector | 抗 mNeonGreen sdAb | 超分辨标记后回收 |
N0210 | GST Selector | 抗 GST sdAb | 经典 pull-down 升级 |
N0110 | MBP Selector | 抗 MBP sdAb | 膜蛋白增溶后复合物捕获 |
N1510-N1517 | ALFA Selector 系列 | 抗 ALFA 标签 sdAb | 通用标签,可与 GFP 组合 |
N1810 | Ubiquitin K48 Selector | 抗 K48 链 sdAb | 蛋白酶体通路研究 |
N1910 | Ubiquitin K63 Selector | 抗 K63 链 sdAb | 信号转导、自噬 |
N2510 | Ubiquitin pan Selector | 泛抗泛素 sdAb | 总泛素化组学 |
N0010-S / N0015-S | Selector Control | 无配基 | 背景扣除、阴性对照 |
三、技术核心:单域抗体配基带来的三大差异
高密度固定
sdAb 仅 12–15 kDa,可在同一琼脂糖微球表面实现 3–5 倍于传统 IgG 的配基密度,从而带来 uL 级树脂即可完成 ng 级富集 的能力。
温和洗脱
sdAb 与抗原结合界面以氢键/疏水作用为主,无多价 Fc 介导的强亲和,因此可在 pH 6.0 或含 2 mM ALFA 竞争肽 条件下定量洗脱,复合物完整性显著优于低 pH 甘氨酸法。
磁珠即用
N0315、N0415、N1515–N1517 提供磁珠版本,2 分钟磁分离 即可完成裂解液预澄清、IP、洗涤三步,与 96 孔磁力板兼容,满足自动化平台需求。
四、场景化价值:让树脂成为实验设计的“积木”
科研痛点 | Nanotag 树脂切入方式 |
超分辨成像后,需回收荧光蛋白验证互作 | 用 GFP Selector 磁珠 30 min 内捕获 GFP-tagged 蛋白,洗脱后直接质谱 |
研究 K63 泛素链在自噬中的动态 | Ubiquitin K63 Selector 树脂区分 K63 与 K48,避免抗体交叉反应 |
同时验证多个荧光标签的亚细胞定位 | ALFA Selector + GFP Selector 双标签并行 IP,节省样品 |
膜蛋白复合物难以在非变性条件下富集 | MBP Selector 树脂与 MBP 融合膜蛋白兼容 0.03 % DDM 条件 |
高通量 CRISPR 筛选后回收报告蛋白 | 96 孔磁珠版 GFP Selector 每孔仅需 5 uL 树脂 |
五、与经典填料对比:性能而非体积
特征 | 传统抗 GFP IgG-琼脂糖 | Nanotag GFP Selector |
配基分子量 | ~150 kDa | ~15 kDa |
推荐树脂体积 | 25–50 uL | 5–10 uL |
洗脱条件 | pH 2.7 甘氨酸 | pH 6.0 或 2 mM ALFA 肽 |
磁珠版本 | 罕见 | 标准 (N0315) |
批次重现性 | 动物血清差异大 | 大肠杆菌表达,序列固定 |
在“微量、原位、多维”成为基础科研主旋律的当下,Nanotag 树脂把传统“纯化工具”升级为“发现工具”。
当你只需要 5 uL 树脂即可回收 GFP-tagged 转录因子;
当你用 30 min 完成 K63 泛素链富集并直接送去质谱;
当你在 96 孔板中并行验证 48 种突变体的互作网络——
你会意识到,实验设计的瓶颈已经从“材料”转向“想象力”。
Nanotag 树脂,让每一微升样品都承载最大化的科学信息。
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