ALFA选择器PE(“可释放肽”)是一种创新的亲和树脂(琼脂糖&磁性),专为在生理条件下高效纯化天然ALFA标签目标蛋白而设计。 每个单位包含10毫克ALFA洗脱肽。
ALFA选择器PE基于一种高亲和力(Kd = 11 nM)的单域抗体(sdAb),该抗体共价固定在4%交联的琼脂糖或磁性琼脂糖珠上。 ALFA选择器PE经过优化,可在生理条件下使用ALFA洗脱肽进行高效、竞争性洗脱。为此,每个单位的ALFA选择器PE都附带10毫克ALFA洗脱肽,足以用于25毫升洗脱缓冲液。
如果需要在低温下洗脱(例如4°C),请使用ALFA选择器CE(“可低温洗脱”)。
或者,可以在酸性或变性条件下进行洗脱。 创新的、定向的、选择性的通过柔性连接链连接,保证了sdAb的高度可及性,并大大消除了批次间的变化。
由于sdAb的单链性质及其共价连接,在洗脱过程中,即使在恶劣条件下(例如SDS样品缓冲液),也不会观察到IgG的轻链和重链的“泄漏”。
ALFA选择器PE因此具有对ALFA融合蛋白的高亲和力和卓越容量,同时显示出可忽略不计的非特异性背景。 ALFA选择器PE不仅与生理缓冲液兼容,还与高严格性缓冲液兼容。因此,ALFA选择器PE为调整结合和洗涤条件以满足实验需求提供了极大的自由度。
艾美捷ALFA选择器PE(包括ALFA肽N1520-10mg):
货号:N1510
克隆号: 1G5变体
宿主: 骆驼
生产方式: 大肠杆菌
应用: 免疫沉淀(IP)
稀释比例: 不适用(N/A)
容量: > 3 ug ALFA标签GFP每uL装填珠子
靶标: ALFA标签
特异性: 识别ALFA标签(SRLEEELRRRLTE)
配方:50%的PBS悬浮液,含有20%乙醇。另外,提供10毫克冻干的ALFA洗脱肽。
运输条件: 常温
保存条件:在4°C下保存,最长可达12个月。不要冷冻!
协议:请将冻干的肽(10毫克)溶解在250 ul蒸馏水中。这将得到40 mg/ml或20 mM(100倍)的ALFA肽浓度。
注意事项: 仅限体外使用/仅用于研究。无毒、无害、无传染性。
文献参考:
G?tzke H, Kilisch M, Martínez-Carranza M, Sograte-Idrissi S, Rajavel A, Schlichthaerle T, Engels N, Jungmann R, Stenmark P, Opazo F, Frey S. The ALFA-tag is a highly versatile tool for nanobody-based bioscience applications. Nat Commun. 2019 Sep 27;10(1):4403. doi: 10.1038/s41467-019-12301-7. PMID: 31562305; PMCID: PMC6764986.
Kilisch M, G?tzke H, Gere-Becker M, Crauel A, Opazo F, Frey S. Discovery and Characterization of an ALFA-Tag-Specific Affinity Resin Optimized for Protein Purification at Low Temperatures in Physiological Buffer. Biomolecules. 2021;11(2):269. Published 2021 Feb 12. doi:10.3390/biom11020269
Cheetham-Wilkinson IJ, Sivalingam B, Flitton C, et al. RpH-ILV: Probe for lysosomal pH and acute LLOMe-induced membrane permeabilization in cell lines and Drosophila. Sci Adv. 2025;11(1):eadr7325. doi:10.1126/sciadv.adr7325 (IP; HEK293T)
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