NanoTag-ALFA选择器PE，高亲和力识别ALFA标签

NanoTag内部开发的单域抗体（sdAb），能够以低皮摩尔（pM）亲和力识别小型、合理设计的ALFA标签（SRLEEELRRRLTE）。

ALFA标签是一种新型的、合理设计的表位标签（SRLEEELRRRLTE），属于NanoTag专有技术的一部分。与大多数传统表位标签不同，ALFA标签是基于合理考虑开发的，这使NanoTag能够为其配备所需的特性。ALFA标签与三种单域抗体（sdAb）结合，为在几乎所有生化和生物医学应用中使用单一表位标签提供了一个独特的平台。该系统的完整特性描述可以在2019年发表于《自然·通讯》的一篇开源文章中找到。

这种单域抗体（sdAb，N1505）是克隆1G5，它是ALFA系统家族中对ALFA标签亲和力最强的成员（约26皮摩尔）。它也是NanoTag在FluoTag?-X2抗ALFA（N1502）、重组抗ALFA抗体（rHcAb；N1582-N1586）、抗ALFA双特异性抗体（N1590-N1592）、sdAb抗ALFA Halo融合蛋白（N1541）以及ALFA选择器ST（N1511）中使用的同一种克隆。

艾美捷ALFA选择器PE（包括ALFA肽N1520-10mg）：

货号：N1505-BIOTIN

克隆号：1G5

宿主：羊驼

生产来源：大肠杆菌

应用：免疫荧光（IF）、西方印迹（WB）

稀释比例：与抗ALFA sdAb HRP进行的ELISA实验中，稀释比例为1:5000

靶标：ALFA标签

特异性：识别ALFA标签（SRLEEELRRRLTE）。

配方：带有DBCO和生物素的sdAb（C端1:1标记）是从pH 7.4的PBS中冻干的。未偶联的sdAb是从5 mM KPi pH 6.0、300 mM NaCl、0.5 mM EDTA pH 6.0中冻干的。用250 L纯去离子水复溶后可立即使用，或用250 L无菌50%甘油复溶后在-80°C下保存。

与HRP偶联的sdAb是从HRP保护缓冲液中冻干的，应使用200 L纯去离子水复溶后在4°C下保存，或使用200 L高纯度、无菌的50%甘油复溶后在-80°C下保存。

分子量（kDa）：16.0

消光系数：18638

运输：常温

储存：含有冻干试剂的安瓿可在2-8°C下保存长达12个月。复溶后，可在-80°C下保存长达6个月。工作分装可在-20°C下保存长达4周。

注意：仅供体外/研究使用。无毒、无害、无传染性。

用抗ALFA sdAb（编号N1505-DBCO，稀释比例1:500）对表达ALFA - 波形蛋白融合蛋白的HeLa细胞进行免疫染色，该sdAb带有10个核苷酸的单链DNA，通过3D DNA - PAINT成像。直方图指的是由小黄矩形标记的区域，在该区域中，虽然两个单独的波形蛋白丝仅相距约90纳米，但它们仍被解析出来。定位精度为5.2纳米。图修改自Gotzke等人，《自然·通讯》2019年。

文献参考：

Kalogriopoulos NA, Tei R, Yan Y, et al. Synthetic GPCRs for programmable sensing and control of cell behaviour. Nature. Published online December 4, 2024. doi:10.1038/s41586-024-08282-3 (N1505-Biotin; magnetic-activated cell sorting MACS; primary human T cells)

Mougios N, Cotroneo ER, Imse N, et al. NanoPlex: a universal strategy for fluorescence microscopy multiplexing using nanobodies with erasable signals. Nat Commun. 2024;15(1):8771. Published 2024 Oct 10. doi:10.1038/s41467-024-53030-w

Shaib AH, Chouaib AA, Chowdhury R, et al. One-step nanoscale expansion microscopy reveals individual protein shapes. Nat Biotechnol. Published online October 9, 2024. doi:10.1038/s41587-024-02431-9