NanoTag-sdAb抗ALPHA生物素：高亲和力单域抗体，精准识别ALFA标签

自主研发的单域抗体（sdAb），能够以低皮摩尔（pM）亲和力识别小尺寸、理性设计的ALFA标签（SRLEEELRRRLTE）。

ALFA标签是一种新型的、理性设计的表位标签（SRLEEELRRRLTE），属于NanoTag专有技术的一部分。与大多数传统表位标签不同，ALFA标签是基于理性考虑开发的，这使得我们能够为其配备所需的特性。结合三种sdAb，ALFA标签为在几乎所有生化和生物医学应用中使用单一表位标签提供了一个独特的平台。该系统的完整特性可以在2019年发表在《自然·通讯》上的一篇开源文章中找到。

这种sdAb（N1505）是克隆1G5，它是ALFA系统家族中对ALFA标签亲和力最强（约26 pM）的成员。它也是我们在FluoTag?-X2抗ALFA（N1502）、重组抗ALFA抗体（rHcAb；N1582-N1586）、抗ALFA双特异性抗体（N1590-N1592）、sdAb抗ALFA Halo融合蛋白（N1541）以及ALFA选择器ST（N1511）中使用的相同克隆。

艾美捷sdAb抗ALPHA生物素：

货号：N1505-BIOTIN

克隆号： 1G5

宿主： 骆驼

生产方式： 大肠杆菌

应用： 免疫荧光（IF）、西方印迹（WB）

稀释比例： 与抗ALFA HRP的ELISA检测中，稀释比例为1:5000

靶标： ALFA标签

特异性： 识别ALFA标签（SRLEEELRRRLTE）。

配方：DBCO和生物素偶联的sdAb（C末端1:1标记）从pH 7.4的PBS中冻干。未偶联的sdAb从5 mM KPi（pH 6.0）、300 mM NaCl、0.5 mM EDTA（pH 6.0）中冻干。使用250 uL纯去离子水复溶后可立即使用，或使用250 uL无菌50%甘油复溶后在-80°C下保存。

偶联辣根过氧化物酶（HRP）的sdAb从HRP保护缓冲液中冻干，应使用200 uL纯去离子水复溶后在4°C下保存，或使用200 uL高纯度、无菌的50%甘油复溶后在-80°C下保存。

分子量： 16.0 kDa

消光系数： 18638

运输条件： 常温

保存条件：含有冻干试剂的安瓿可在2 - 8°C下保存长达12个月。复溶后，在-80°C下保存最长6个月。工作液可在-20°C下保存最长4周。

注意事项： 仅限体外使用/仅用于研究。无毒、无害、无传染性。

实验示例：

使用抗ALFA sdAb（编号N1505-DBCO，稀释比例1:500）对表达ALFA-波形蛋白融合蛋白的HeLa细胞进行免疫染色，该抗体携带一条10核苷酸的单链DNA，通过3D DNA-PAINT成像。直方图指的是由一个小黄矩形标记的区域，在该区域中，尽管两条单独的波形蛋白丝相距仅约90纳米，但它们仍被清晰分辨。定位精度为5.2纳米。该图修改自Gotzke等人2019年发表在《自然·通讯》上的文章。

文献参考：

G?tzke H, Kilisch M, Martínez-Carranza M, Sograte-Idrissi S, Rajavel A, Schlichthaerle T, Engels N, Jungmann R, Stenmark P, Opazo F, Frey S. The ALFA-tag is a highly versatile tool for nanobody-based bioscience applications. Nat Commun. 2019 Sep 27;10(1):4403. doi: 10.1038/s41467-019-12301-7. PMID: 31562305; PMCID: PMC6764986.

Honsa M, Pachmayr I, Heinze L, et al. Imaging Ligand-Receptor Interactions at Single-Protein Resolution with DNA-PAINT. Small Methods. Published online April 3, 2025. doi:10.1002/smtd.202401799 (IF; DNA-PAINT; A549 cells)

Cheetham-Wilkinson IJ, Sivalingam B, Flitton C, et al. RpH-ILV: Probe for lysosomal pH and acute LLOMe-induced membrane permeabilization in cell lines and Drosophila. Sci Adv. 2025;11(1):eadr7325. doi:10.1126/sciadv.adr7325 (N1505-Biotin; WB; HEK293T; fruit fly S2 cells)