原因有很多： 

a)你的细胞中不表达这种蛋白质，换一种细胞；

b)你的细胞中的蛋白质被降解掉了，你必需加入 PMSF，抑制蛋白酶活性；

c)你的抗体不能识别目标蛋白，多看看说明，看是否有问题。

灵敏，可达ng 级，用Ecl 显色法理论上可达pg 级。方便，特异性高。