一、产品问题

问：你们的试剂盒可以用于诊断目的吗？ 

答：我们目前所有的检测试剂盒仅用于研究目的，不能用于诊断。

问：一个试剂盒可以进行多少次测试？ 

答：试剂盒的总测试次数可以在目录编号中找到。例如，QuantiChrom™肌酐检测试剂盒（目录编号DICT-500）足够在96孔板中进行500次测试。试剂盒的大小指的是标准96孔格式下的总测试次数，包括样品以及所需的对照品和标准品。

问：检测是否具有物种特异性？ 

答：BioAssay Systems的大多数生化检测试剂盒不具有物种特异性，已测试过人类、小鼠、大鼠、牛等样本。在极少数情况下，不同物种的酶的生化特性可能需要对协议进行调整，例如改变pH值，才能进行检测。

问：可以使用哪些类型的样本？ 

答：通常，我们的检测可以用于多种类型的样本，包括生物、食品、饮料和环境样本，前提是存在合适的样本制备方法。通常，感兴趣的分析物应为澄清液体或易于提取到澄清液体中，最好是水溶液。

问：在哪里可以找到试剂盒的有效期？ 

答：有效期因具体试剂盒而异。请阅读检测协议或访问我们的网站（www.bioassaysys.com）并搜索您感兴趣的试剂盒。有效期从交付日期开始计算。-yu8fs6b0y4cq6dv4as2t9w8c10ac41dl70c7wf.xn--tlqud5a264gokgt6jr5av7dyfe6578c0h0b./)

问：每次检测运行是否需要使用标准品或标准曲线？ 

答：是的，强烈建议使用。

问：你们的一些检测试剂盒既可以用荧光法也可以用比色法。我应该使用哪种方法？ 

答：这取决于您的设备。荧光检测通常比比色检测灵敏度高10倍以上。这意味着如果您使用荧光检测，可以使用更少的样本，这在样本量有限的情况下非常理想。

问：我可以将未使用的试剂储存起来以备将来使用吗？ 

答：可以，未使用的试剂可以根据检测协议储存。应避免试剂的反复冻融循环。

问：在哪里可以找到使用你们产品的出版物参考文献？ 

答：引用文献可以在我们的网站上找到，网址为http://www.bioassaysys.com/support.php。如果您搜索您感兴趣的产品，可以点击“出版物”链接查看引用列表。每种产品的引用文献都会定期更新。

问：什么是检测限（LOD）？它与定量限（LOQ）有什么区别？ 

答：在分析化学中，检测限（LOD）是指可以与空白值区分开来的最低物质含量。检测限通常根据空白值的均值、标准偏差和置信因子来估算。通常，LOD定义为3倍空白值的标准偏差。定量限（LOQ）的确定方法与LOD类似，但定义为10倍空白值的标准偏差。

问：为什么我的读数与你们的检测协议上的数据不同？ 

答：读数可能会因多种因素而不同：您的仪器（分光光度计、酶标仪）和配件（滤光片或单色器）、板的类型（透明、白色或黑色）及其几何形状（圆形孔、方形孔、平底或V形底）以及移液的准确性。因此，强烈建议在每次检测运行中与样品一起运行标准品。

二、设备和配件

问：我没有酶标仪，可以用我们的分光光度计和比色皿代替吗？ 

答：可以。我们的检测可以在所有使用比色皿的分光光度计或使用微孔板（如96孔板）的酶标仪上进行。大多数检测可以根据比色皿、96孔或384孔格式的不同体积进行调整。

问：如何将微孔板格式的测试数量转换为比色皿格式？ 

答：转换取决于比色皿的大小和96孔板中检测的最终体积。例如，对于DICT-500，96孔格式的最终体积为205 μL。对于1 mL比色皿，5个孔相当于1个比色皿。因此，1 mL比色皿的检测次数为500 ÷ 5 = 100次/试剂盒。或者，如果使用小体积比色皿（例如可容纳200 μL体积的比色皿），可以使用与96孔板相同的体积。

问：推荐使用哪种板进行检测？ 

答：对于比色检测，使用透明平底板进行光密度（OD）测量。对于荧光检测，推荐使用黑色板。对于发光检测，使用白色不透明板。

问：检测协议建议在550-620 nm读取，但我最接近的滤光片是540 nm。我还能在酶标仪上运行检测吗？

答：我们通常建议在检测按规格工作范围内使用波长。我们不建议在给定范围外测量，因为检测的灵敏度通常会降低。在某些情况下，在狭窄的波长范围外进行准确测量是不可能的。

问：我应该使用哪个滤光片来测量发光？ 

答：使用我们的检测进行发光检测时，不需要使用滤光片。

三、样本处理

问：我的样本很浑浊。我还能使用它吗？ 

答：所有样本都应该是澄清的，没有沉淀物或颗粒。如果有颗粒，应通过离心（例如14,000 rpm离心5分钟）或通过0.45 μm滤器过滤来去除。

问：我今天不能进行检测。样本可以冷冻吗？ 

答：原则上，建议使用新鲜制备的样本进行检测。然而，大多数分析物在适当储存（例如4°C、-20°C、-80°C或液氮中）时是稳定的。

问：我应该使用血清样本还是血浆样本？ 

答：通常，血清样本比血浆样本更受欢迎，因为血清样本中不含抗凝剂。然而，对于我们的大多数检测，可以使用血清或血浆。

问：如果数据表中没有描述，如何为检测制备细胞和组织样本？ 

答：样本制备方法可能因样本类型和分析物而异。建议查阅相关文献。以下是一般指南，适用于大多数情况：

组织样本：从20-100 mg组织开始，加入200-1000 μL冰冷的PBS。通过在冰上使用Dounce匀浆器（10-20次）或在冰水浴中进行超声处理来实现组织裂解。可以在显微镜下检查组织裂解程度。以14,000 g离心10分钟。将澄清的上清液转移到干净的管中。最好对不同稀释度的样本进行预测试。选择读数在标准曲线检测范围内的稀释度进行进一步检测。大多数样本如果未立即检测，可以储存在-80°C。

细胞样本：将约两百万（2 × 10^6）收获的细胞在冰上悬浮在400 μL PBS中。通过在冰上使用Dounce匀浆器（10-20次）或在冰水浴中进行超声处理来实现细胞裂解。可以在显微镜下检查细胞裂解程度。以14,000 g离心10分钟。将澄清的上清液转移到干净的管中。最好对不同稀释度的样本进行预测试。选择读数在标准曲线线性范围内的稀释度进行进一步检测。大多数样本如果未立即检测，可以储存在-80°C。

如果要使用裂解缓冲液，建议先进行检测以测试裂解缓冲液中的成分是否干扰检测。这可以通过运行两个标准曲线来实现：一个在H2O（或数据表要求的缓冲液）中制备，另一个在与样本相同比例的裂解缓冲液中制备。如果两个标准曲线相同，则没有干扰，可以安全使用裂解缓冲液。如果标准曲线有差异，仍然可以使用裂解缓冲液，前提是标准曲线保持线性；然而，用于分析裂解样本的标准曲线需要在裂解缓冲液中制备。

问：我应该使用多少样本进行检测？ 

答：对于未知样本，应进行预测试以评估最佳稀释度。制备样本的系列稀释，并选择读数在检测范围内的稀释度（理想情况下在标准曲线的中间）。然后按此稀释因子稀释样本并重新运行检测，将结果乘以稀释因子。

四、订购、运输、接收和储存

问：你们的产品是冰运的吗？ 

答：有些产品在室温下运输，而有些产品则在冰垫或干冰上运输（这适用于目录编号以字母“E”开头的试剂盒，例如ETGA-100）。

问：我们如何从国外购买你们的产品？ 

答：我们建议您联系您所在国家或附近的国家的分销商（http://www.bioassaysys.com/distributors.php）。如果您的国家未列出，您可以直接从我们这里订购。请在下订单前联系我们（info@bioassaysys.com）。

问：我收到试剂盒后应该做什么？

答：立即打开试剂盒并确定适当的储存条件。请参考检测协议中的“试剂盒内容”下的“储存条件”。相应地储存试剂盒组件。

· ELISA比色法实验显色，是一个酶催化的实验。在一定范围内，环境温度越高，酶活性越强，相同孵育时间内，温度高的，检测数据高。相同温度，孵育时间长的，检测数据高。

· 说明书的标曲只是一个参考用途，展示大概的结果形式。不能直接使用，否则，试剂盒就没有必要提供标准品了，客户直接用说明书的曲线来计算了，对吧。【每次实验，当时都需要做标准曲线，才是最准确的方法】

· 标准曲线是否良好？ 客户可以绘制相应的拟合曲线（线性，或者曲线形式），R2大于0.9以上是可以接受的，0.99那就是非常好，小数点后面9越多越好。

* 试剂盒规格的48或者96，通常代表的是反应次数或者孔的数量。而不是样品数量。（标准品，对照都会参与到反应或者加入到孔中，因此样品数量肯定会少）

试剂盒做一次实验，需要客户做：6个标准品（标准品数量，根据各个说明书里面说的来设置，6个浓度点）+ 一个空白孔（标准含量为0） = 7。通常每个实验都要做复孔（最少2个复孔，也有做3个复孔的。2个复孔意味着1个东西，需要加到2个孔，统计学需求，算平均值等），这么一来被占用的孔就是7*2=14个孔。96-14=82个孔，只有这82个孔可以给客户拿去测试他的样品。如果也算是复孔，那么就是82/2=41个样品。这是最多可以测试多少样品。

总结：

【2个复孔】样品数量= [ 96 - （标准品数量+对照组数量）*2] / 2

【3个复孔】样品数量= [ 96 - （标准品数量+对照组数量）*3] / 3

#强调#：标准品的数量，阳性对照，阴性对照 的设置，根据说明书来，有些试剂盒是没有阳性对照的。

以上为一次性将试剂盒用完的样品数量。如果客户要做2次实验，需要绘制2次标曲。对应的，继续相减。

1. 主要涉及ATP类的试剂盒，消耗能量ATP，发光（萤火虫）。

2. 主要的实验：荧光素酶分析实验。

使用仪器：

1. 化学发光仪，

2. 光度计（Luminometer），

3. 多功能酶标仪（含化学发光，生物发光检测模块）。

1.试剂盒使用前，通常需要在室温下平衡30-60min。(温度对酶催化反应有影响）。

2.洗板时需保证微孔板平放，将洗涤液注满各孔，但尽量避免漏液溢液，以每孔300 µl为宜；板洗次数一般为3次，要保证洗板的浸泡时间，每次浸泡时间一般为30-60 秒；尽量减少洗液残留量，推荐每次洗板后进行拍板，并及时更换吸水纸，避免吸水纸的碎屑粘到反应孔内。

比色法：特定波长光穿透样品，光被吸收的情况。（酶标仪）（分光光度计）

荧光法：特定波长光，激发染料，发出其它波长光的情况。（荧光/多功能，酶标仪）