OxiSelect 体外ROS/RNS检测试剂盒，双标曲灵活定量分析系统

一、产品概述与核心价值

由艾美捷代理Cell Biolabs推出的OxiSelect 体外活性氧/活性氮检测试剂盒（绿色荧光，货号STA-347，96次规格）是一款专为定量检测样本中总自由基水平设计的功能型试剂盒。其核心技术基于淬灭荧光探针DCFH-DiOxyQ，该探针经去淬灭处理后转化为高反应活性的DCFH形式，能够与样本中的ROS/RNS（包括过氧化氢、过氧自由基、一氧化氮和过氧亚硝酸根阴离子）发生特异性氧化反应，生成具有强烈绿色荧光的DCF产物。荧光强度与总ROS/RNS水平呈正比，检测灵敏度可达DCF 10 pM、过氧化氢40 nM。

二、适用场景与科研价值

氧化应激在血管疾病、糖尿病、肾缺血、动脉粥样硬化、肺部病变、炎症性疾病、癌症及衰老等多种病理过程中扮演关键角色。本试剂盒适用于以下研究场景：

1. 总自由基水平评估：定量测定细胞培养上清、组织匀浆或体液样本中的总体氧化应激状态

2. 抗氧化功效评价：对比添加候选抗氧化剂前后样本荧光强度的变化，判断其清除自由基的能力

3. 药物安全性筛选：检测化合物是否诱导氧化应激升高，作为毒性评价指标之一

三、操作流程与关键参数

核心步骤：

将待测样本或标准品加入96孔荧光板孔中，同时加入催化剂加速氧化反应

经短暂孵育后，加入已制备的DCFH探针工作液

室温避光反应适当时间后，使用荧光酶标仪（激发波长480 nm，发射波长530 nm）读取荧光值

通过过氧化氢或DCF标准曲线计算样本中总自由基含量

关键质控点：

探针制备需严格按说明书操作，确保淬灭去除完全

反应体系应避光进行，防止光漂白导致信号衰减

建议设置阳性对照（如已知过氧化氢浓度）和空白对照，确保批次间数据可比性

四、试剂盒组分与储存须知

试剂盒含以下组分（室温运输，但建议收到后按指定条件保存）：引物试剂250 uL、稳定缓冲液（10×）1.5 mL、催化剂（250×）20 uL、DCF-DiOxyQ探针50 uL（甲醇溶液，琥珀色管避光保存）、DCF标准品100 uL（1 mM DMSO溶液）、过氧化氢标准品100 uL（8.821 M溶液）。各组分启封后应严格避免反复冻融，探针及标准品需避光防潮保存。

五、配套产品推荐

为构建完整的氧化应激研究体系，建议搭配以下关联试剂盒使用：

STA-330：TBARS检测试剂盒（MDA定量，评估脂质过氧化）

STA-340：超氧化物歧化酶活性检测试剂盒

STA-341：过氧化氢酶活性检测试剂盒

STA-342：细胞内ROS检测试剂盒（绿色荧光，适用于活细胞成像）

STA-832：MDA加合物竞争性ELISA试剂盒

本试剂盒提供96次反应用量，涵盖标准曲线及未知样本检测需求。结果判定需结合实验设计设置合理对照，并注意不同样本基质可能对荧光信号产生干扰，必要时需进行样本稀释或基质匹配校准。

文献参考

1. Bass DA, Parce JW, Dechatelet LR, Szejda P, Seeds MC, Thomas M. Flow cytometric studies ofoxidative product formation by neutrophils: A graded response to membrane stimulation. J Immunol.1983; 130:1910-1917.

2. Brandt R, Keston AS. Synthesis of diacetyldichlorofluorescin: A stable reagent for fluorometricanalysis. Anal Biochem. 1965; 11:6-9.

3. Keston AS, Brandt R. The fluorometric analysis of ultramicro quantities of hydrogen peroxide. AnalBiochem.1965; 11:1-5.