在表观遗传学研究领域,组蛋白修饰作为关键的表观遗传标记,在基因表达调控中发挥着至关重要的作用。EpiQuik组蛋白H3修饰多重检测试剂盒比色法货号:P-3100-96以其创新的技术设计和优质的性能表现,为研究人员提供了一次性同时检测21种组蛋白H3修饰模式的高效解决方案。
Epigentek集团公司是创新技术和表观遗传学相关研究产品的开发商和供应商。公司开发了包括400多个专利产品的全面的产品组合,为表观遗传学方面的研究和新药研发提供全面系统的解决方案。各界备受推崇的学者、制药企业以及先进的生物技术公司都在使用Epigentek产品。相比普通方法的产品而言,这些独特的产品在科研分析过程中更简单、更快捷、更方便、更有效。
技术原理与创新突破
该试剂盒基于创新的ELISA-like检测原理,通过特异性抗体识别系统和比色检测技术,实现了对多种组蛋白H3修饰的同步定量分析。其核心技术突破在于将复杂的组蛋白修饰检测流程整合为一个简单、高效的操作体系。
检测过程中,每种在特定位点修饰的组蛋白H3都会被包被在条带微孔中的特异性抗体捕获。随后通过检测抗体进行识别,最后使用显色试剂进行信号检测。修饰组蛋白的比例与在450nm波长下测量的吸光度强度成正比,这种直接的定量关系确保了检测结果的准确性。

使用EpiQuik 总组蛋白提取试剂盒(目录号OP-0006)从MCF-7和MDA-231细胞制备组蛋白提取物,并使用EpiQuik组蛋白H3修饰多重检测试剂盒(比色法)筛选和测量多种组蛋白H3的修饰。使用100ng的总组蛋白。
优质的性能特点
该试剂盒在多个技术指标上展现出显著优势:
高效的多重检测能力:能够同时筛选和测量21种不同的组蛋白H3修饰,包括所有最重要和最具代表性的修饰模式。这一特性大大提高了研究效率,避免了传统方法需要多次实验的繁琐流程。
出色的检测灵敏度:每个修饰模式的检测阈值可低至0.5ng/孔,检测范围从20ng到500ng/孔的组蛋白提取物。这种高灵敏度使其即使对低丰度修饰也能实现准确检测。
快速的操作流程:整个检测过程仅需2小时30分钟即可完成,相比传统方法显著提高了实验效率。
灵活的实验设计:条带微孔板格式使检测既适用于手动操作,也满足高通量分析的需求。试剂盒额外提供的两个8孔条带可用于样品量的预优化,帮助确定最适合的输入量。
可靠的质控系统:包含的检测对照可用于每种组蛋白H3修饰的定量,而总组蛋白H3套装可用于标准化总组蛋白H3水平,便于不同样品或处理条件间的比较。
在表观遗传学研究中的重要意义
组蛋白修饰已被确认为重要的表观遗传调控因子。组蛋白的翻译后修饰包括组蛋白乙酰转移酶介导的特异性赖氨酸残基乙酰化、组蛋白去乙酰化酶介导的去乙酰化、组蛋白甲基转移酶介导的赖氨酸和精氨酸残基甲基化、组蛋白去甲基化酶介导的赖氨酸残基去甲基化,以及组蛋白激酶介导的特异性丝氨酸基团磷酸化。
此外,组蛋白修饰还包括泛素、小泛素样修饰子和多ADP-核糖单元的连接。除了DNA甲基化之外,组蛋白乙酰化和组蛋白甲基化是研究最深入的表观遗传标记。通常,H3-K4、H3-K36或H3-K79的三甲基化会导致染色质开放构型,因此是常染色质的特征。常染色质也具有高水平的组蛋白乙酰化特征,这是由组蛋白乙酰转移酶介导的。
赖氨酸残基可以发生单、双或三甲基化,每种形式都能差异性地调节染色质结构和转录。与其他组蛋白修饰(如磷酸化)一起,这种巨大的变异导致了不同修饰的多种可能组合。这可能构成了一个"组蛋白密码",可以被不同的细胞因子读取和解释。
实验要求与技术规范
该试剂盒对起始材料的要求灵活:输入材料可以是组蛋白提取物或纯化的组蛋白H3蛋白。对于组蛋白提取物,每个反应的用量为20ng至500ng,最佳范围取决于组蛋白提取物的纯度,通常在50ng至100ng之间。对于纯化的组蛋白H3蛋白,每个反应的用量为1ng至25ng,最佳范围为4ng至5ng。
这种灵活的样品要求使得试剂盒能够适应不同纯度和浓度的样品,为研究人员提供了更大的实验自由度。特别是对于珍贵样品,试剂盒的高灵敏度确保了即使使用少量样品也能获得可靠结果。
技术创新与应用前景
该试剂盒的技术创新主要体现在四个方面:多重检测能力的突破、检测速度的优化、操作流程的简化和检测灵敏度的提升。这些改进使得研究人员能够更快速、更全面地获得组蛋白H3修饰的详细信息。
在基础研究领域,该试剂盒为探索组蛋白修饰在细胞分化、发育和疾病发生中的作用提供了重要工具。在药物研发方面,它可用于评估表观遗传药物对组蛋白修饰模式的影响。在临床研究中,组蛋白H3修饰谱的分析可能为疾病诊断和治疗提供新的生物标志物。
特别是在精准医疗快速发展的背景下,该试剂盒的高通量特性使其能够适应大规模样本分析的需求,而其多重检测能力则使研究人员能够获得更全面的组蛋白修饰信息。随着表观遗传学研究的深入,对组蛋白修饰网络的理解变得越来越重要,该试剂盒的技术特点正好满足这一研究需求。
质量保证与可靠性
试剂盒的稳定性和可靠性通过精心设计的质控系统得到保证。检测对照的设置确保了每个修饰的定量准确性,而总组蛋白H3标准化系统则保证了不同样品间比较的可靠性。与传统的放射性检测、电泳或色谱方法相比,该试剂盒无需使用放射性物质,也无需昂贵的设备,使更多实验室能够进行组蛋白修饰研究。
在表观遗传学研究方法学快速发展的今天,该试剂盒为研究人员提供了一个经过验证的、可靠的技术平台。其优质的性能指标和广泛的应用范围,使其成为探索组蛋白修饰生物学功能的理想工具。
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作为Epigentek 的独家代理,艾美捷科技为中国客户提供包括DNA甲基化研究工具、染色质结构分析、组蛋白甲基化研究、乙酰化与去乙酰化分析、DNA损伤与修补、组蛋白磷酸化、蛋白泛素化等系列研究试剂盒和抗体产品等全系列解决方案。
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