MethylFlash 全局DNA羟甲基化（5-hmC）ELISA简易试剂盒，本底更低、信号窗口更大

一、产品背景

5-羟甲基胞嘧啶（5-hmC）是DNA中的第六种碱基，在转录调控中发挥重要功能。研究表明，5-hmC在人和小鼠的大脑及胚胎干细胞中含量丰富。在哺乳动物体内，5-hmC由5-mC经TET家族5-mC羟化酶氧化反应生成。5-hmC具有组织特异性，其含量从培养细胞系中的不可检测水平到人脑组织中的0.6%不等，在某些物种中甚至可高达总DNA的8%。近年来，5-hmC作为一种重要的表观遗传修饰，其在表型和基因表达中的生物学意义已获得广泛认可。例如，几乎所有癌症中均表现出5-hmC含量的全局性下降（DNA低羟甲基化），因此5-hmC已被提议作为癌症的分子标志物和治疗靶点。

二、产品概述

由艾美捷代理Epigentek推出的MethylFlash 全局DNA羟甲基化（5-hmC）ELISA简易试剂盒（比色法）（货号：P-1032）是一套完整的优化缓冲液和试剂组合，通过特异性检测5-羟甲基胞嘧啶（5-hmC）水平，以简化的“一步法”类ELISA形式比色定量全局DNA羟甲基化状态。作为Epigentek广受欢迎的全局DNA甲基化技术的第四代产品，该试剂盒在前代MethylFlash试剂盒基础上进一步优化，提升了速度、简便性、灵敏度和重现性。

本试剂盒还专门针对与MethylFlash全局DNA甲基化（5-mC）ELISA简易试剂盒（比色法）配对使用进行了优化，可同时定量甲基化DNA和羟甲基化DNA。

三、产品优势与特点

快速——减少操作步骤，整个流程仅需2小时。

稳健——改进的试剂盒组分使检测具有更大的“信号窗口”，减少重复间变异。

便捷——本底噪声低，无需DNA变性及板封闭步骤。

灵敏——检测限可低至100 ng输入DNA中0.01%的羟甲基化DNA。

特异——对5-hmC具有高特异性，在样本DNA浓度范围内与未甲基化胞嘧啶或甲基化胞嘧啶无交叉反应。

通用——提供阳性和阴性对照，可检测任何物种的单链或双链DNA羟甲基化。

准确——优化的阳性对照可按百分比梯度稀释，使检测更准确，与HPLC-MS分析高度可比。

灵活——条孔微板格式，适用于手动或高通量分析。

四、原理与操作流程

本试剂盒包含全局DNA羟甲基化定量所需的全部试剂。在检测中，DNA结合至经特殊处理具有高DNA亲和力的条孔中。DNA的羟甲基化部分通过基于5-hmC单克隆抗体的检测复合物以一步法方式检测，随后通过微板分光光度计读取吸光度进行比色定量。羟甲基化DNA的百分比与所测OD强度成正比。

五、起始材料

输入DNA应相对纯净，260/280比值大于1.6，可用水或TE缓冲液稀释。每个反应的DNA用量范围为20 ng至200 ng。推荐使用100 ng DNA，此为获得最佳结果的优化输入量。

六、文献参考

Osuru HP et. al. (June 2026). Epigenetically driven impairment of BDNF-ARC signaling contributes to circadian and cognitive disarray in a mouse model of postoperative delirium. Alzheimers Dement. 22(6):e71556. PubMed: 42298296

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