Cell Biolabs ADP检测试剂盒的检测原理及储存说明

发布者：艾美捷科技发布时间：2025-02-24

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腺苷二磷酸（ADP）是一种在多种细胞过程中发挥能量传递作用的有机分子，例如引发神经冲动、肌肉收缩和化学物质合成的酶促反应。ADP存在于所有生物体中，由三个部分组成：含氮碱基（腺嘌呤）、糖（核糖）和焦磷酸基团。在产生ATP的一系列酶促反应（如糖酵解或氧化磷酸化）中，ADP会被消耗。在植物中，阳光通过光合作用将ADP转化为ATP。代谢消耗后，ATP会被转化为腺苷二磷酸（ADP）或腺苷单磷酸（AMP）。

Cell BioLabs的ADP检测试剂盒是一种简单的荧光法检测方法，可在96孔微孔板格式中测量生物样本中总ADP的含量。每个试剂盒提供足够的试剂进行多达100次检测（包括空白、ADP标准品和未知样本）。通过与已知浓度的ADP标准品进行比较，确定样本中的ADP浓度。该试剂盒的检测灵敏度下限为3.1 ?M ADP。

注意：每个样本重复需要2次检测，一次用丙酮酸激酶处理（+PK），一次不处理（-PK）。ADP的计算基于两个孔的相对荧光单位（RFU）读数差异。

作为Cell Biolabs全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品ADP检测试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

产品名称	货号	详情
ADP检测试剂盒	MET-5164	查看

ADP检测试剂盒检测原理：

Cell BioLabs的ADP检测试剂盒用于测量生物样本中的总ADP。ADP和磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）在丙酮酸激酶的作用下被转化为ATP和丙酮酸。随后，丙酮酸在丙酮酸氧化酶的作用下，在磷酸和氧气存在的情况下被氧化为乙酰磷酸、二氧化碳和过氧化氢。生成的过氧化氢通过高特异性的荧光探针进行检测。辣根过氧化物酶催化探针与过氧化氢之间的反应，二者以1:1的比例结合。样本和标准品在96孔微孔板格式中进行比较，孵育30分钟后，使用标准96孔荧光板读数器读取结果。

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试剂盒组成

盒子1（蓝色冰袋运输）

1. ADP标准品（部件号51641C）：1管50 ?L，浓度为20 mM。

2. 氯化镁（MgCl?）（部件号51623A）：1管200 ?L，浓度为1 M。

3. 磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）（部件号51585C）：1管50 ?L，浓度为100 mM。

4. 丙酮酸激酶（部件号51625D）：1管200 ?L。

5. 丙酮酸氧化酶（部件号50295C）：1管300 ?L。

6. 荧光探针（部件号50231C）：1管50 ?L，溶于DMSO。

7. 辣根过氧化物酶（HRP）（部件号234402-T）：1管10 ?L，浓度为100 U/mL，溶于甘油。

8. 黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）（部件号50293C）：1管50 ?L，浓度为2 mM。

9. 硫胺素焦磷酸（TPP）（部件号50294C）：1管50 ?L，浓度为2 mM。

盒子2（蓝色冰袋运输）

1. 中和缓冲液（部件号51634A）：1瓶25 mL。

2. 10倍检测缓冲液（部件号51622A）：1瓶25 mL。

未提供材料

1. 蒸馏水或去离子水

2. 10 kDa分子量截留（MWCO）离心过滤器（例如Amicon Ultra 0.5 mL）

3. 标准96孔黑色荧光微孔板和/或黑色细胞培养微孔板

4. 高浓度高氯酸

储存条件

收到试剂盒后，将10倍检测缓冲液和中和缓冲液在室温下保存。将丙酮酸激酶和丙酮酸氧化酶储存在-80℃。将其他所有组分储存在-20℃。荧光探针对光敏感，必须妥善保存。避免多次冻融循环。

结果示例

以下图表展示了ADP检测试剂盒的典型结果。以下数据仅供参考，不应用于解释或计算实际样本结果。

文献参考：

1. Knowles J R (1980) Annu. Rev. Biochem. 49: 877–919.

2. Votyakova TV, and Reynolds IJ (2001) Neurochem. 79:266.

3. T?rnroth-Horsefield S and Neutze R. (2008). Proc Natl Acad Sci USA. 105:19565–19566.

4. Nichols CG, Shyng SL, Nestorowicz A, Glaser B, Clement JP, Gonzalez G, Aguilar-Bryan L,Permutt MA, and Bryan J. (1996) Science. 272:1785-1787.

5. Murugappa S, and Kunapuli SP (2006). Front. Biosci. 11: 1977–1986.

Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈（San Diego），是有名的细胞学试剂品牌，作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的高端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。