腺苷三磷酸(ATP)是一种为多种细胞过程提供能量的有机分子,例如引发神经冲动、肌肉收缩和化学物质合成的酶促反应。ATP存在于所有生物体中,属于核苷三磷酸,由三个部分组成:含氮碱基(腺嘌呤)、糖(核糖)和三磷酸基团。在动物中,ATP通过一系列酶促反应(如糖酵解或氧化磷酸化)产生。在植物中,阳光通过光合作用转化为ATP。代谢消耗后,ATP会被转化为腺苷二磷酸(ADP)或腺苷单磷酸(AMP)。其他酶促反应会再生ATP(ATP也是DNA和RNA的前体),此外,ATP还作为辅酶使用。
Cell BioLabs的ATP检测试剂盒是一种简单的荧光法检测方法,可在96孔微孔板格式中测量生物样本中总ATP的含量。每个试剂盒提供足够的试剂进行多达100次检测(包括空白、ATP标准品和未知样本)。通过与已知浓度的ATP标准品进行比较,确定样本中的ATP浓度。该试剂盒的检测灵敏度下限为1.56 ?M ATP。
注意:每个样本重复需要2次检测,一次用甘油激酶处理(+GK),一次不处理(-GK)。ATP的计算基于两个孔的相对荧光单位(RFU)读数差异。
作为Cell Biolabs全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品ATP检测试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
ATP检测试剂盒 | MET-5163 | 查看 |
ATP检测试剂盒检测原理:
Cell BioLabs的ATP检测试剂盒用于测量生物样本中的总ATP。ATP和甘油在甘油激酶的作用下被转化为ADP和甘油-3-磷酸。随后,甘油-3-磷酸和氧气在甘油-3-磷酸氧化酶的作用下被转化为磷酸甘油和过氧化氢。生成的过氧化氢通过高特异性的荧光探针进行检测。辣根过氧化物酶催化探针与过氧化氢之间的反应,二者以1:1的比例结合。样本和标准品在96孔微孔板格式中进行比较,孵育30分钟后,使用标准96孔荧光板读数器读取结果。
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试剂盒组成
盒子1(蓝色冰袋运输)
1. ATP标准品(部件号51631C):1管50 ?L,浓度为10 mM。
2. 甘油激酶(部件号51632D):1管330 ?L,浓度为15.2 U/mL。
3. 甘油-3-磷酸氧化酶(部件号51635D):1管610 ?L,浓度为37 U/mL。
4. 荧光探针(部件号50231C):1管50 ?L,溶于DMSO。
5. 辣根过氧化物酶(HRP)(部件号234402-T):1管10 ?L,浓度为100 U/mL,溶于甘油。
盒子2(蓝色冰袋运输)
1. 中和缓冲液(部件号51634A):1瓶25 mL。
2. 10倍检测缓冲液(部件号51633A):1瓶25 mL。
未提供材料
1. 蒸馏水或去离子水
2. 10 kDa分子量截留(MWCO)离心过滤器(例如Amicon Ultra 0.5 mL)
3. 标准96孔黑色荧光微孔板和/或黑色细胞培养微孔板
4. 高浓度高氯酸
储存条件
收到试剂盒后,将10倍检测缓冲液和中和缓冲液在室温下保存。将甘油激酶和甘油-3-磷酸氧化酶储存在-80℃。将其他所有组分储存在-20℃。荧光探针对光敏感,必须妥善保存。避免多次冻融循环。
结果示例:
下图显示了典型的ATP检测试剂盒结果。应使用以下数据仅供参考。这些数据不应用于解释或计算实际的样本结果。
文献参考:
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2. Votyakova TV, and Reynolds IJ (2001) Neurochem. 79:266.
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5. Watt IN, Montgomery MG, Runswick MJ, Leslie AGW, and Walker JE (2010) Proc Natl Acad Sci USA 107:16823-16827
Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈(San Diego),是有名的细胞学试剂品牌,作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商,为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的高端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。
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