Cell Biolabs 谷氨酰胺检测试剂盒(荧光法)--灵敏的定量荧光法检测谷氨酰胺的试剂盒

谷氨酰胺是一种条件性必需氨基酸（在应激条件下需要从饮食中摄取），在蛋白质生物合成中发挥重要作用。谷氨酰胺的侧链与谷氨酸几乎完全相同，唯一的区别是侧链上的羧基被酰胺基团取代。谷氨酰胺是人体血液中最丰富的游离氨基酸。许多食物富含谷氨酰胺，包括富含蛋白质的食物，如乳制品、鸡蛋、鱼类、鸡肉、牛肉，以及蔬菜，如豆类、甜菜、卷心菜、菠菜和胡萝卜。除了参与蛋白质合成和功能外，谷氨酰胺还在肾脏中通过产生铵离子调节酸碱平衡，作为仅次于葡萄糖的细胞能量来源，以及在许多合成过程中（如嘌呤合成）提供氮源。癌细胞依赖谷氨酰胺作为氮源和碳源。谷氨酰胺在某些肿瘤中的重要性已被证实。例如，阻断谷氨酰胺代谢已被证明可以抑制乳腺癌、肝癌、肾癌和T细胞急性淋巴细胞白血病等多种肿瘤的生长。

Cell BioLabs的谷氨酰胺检测试剂盒是一种简单的检测方法，无需预处理即可测量生物样本中的谷氨酰胺水平。该试剂盒的检测灵敏度下限为1.56 ?M谷氨酰胺。每个试剂盒提供足够的试剂进行多达200次检测（包括标准曲线和未知样本）。

注意：每个样本重复需要2次检测，一次用谷氨酰胺酶处理（+G），一次不处理（-G）。谷氨酰胺的计算基于两个孔的相对荧光单位（RFU）读数差异。

作为Cell Biolabs全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品谷氨酰胺检测试剂盒(荧光法)。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

谷氨酰胺检测试剂盒(荧光法)检测原理：

谷氨酰胺检测试剂盒是一种灵敏的定量荧光法检测谷氨酰胺的试剂盒。谷氨酰胺酶将谷氨酰胺和水（H?O）转化为谷氨酸和氨（NH?）。谷氨酸氧化酶将谷氨酸转化为α-酮戊二酸、氨（NH?）以及过氧化氢（H?O?）。反应中还加入了L-丙氨酸和谷氨酸丙酮酸转氨酶，以再生谷氨酸和H?O?。因此，反应可以多次循环，从而显著放大H?O?的生成。在辣根过氧化物酶（HRP）存在的情况下，荧光探针与H?O?以1:1的化学计量比反应，生成高荧光的荧光素。荧光素产物可以通过荧光微孔板读数器在530-560 nm激发波长和590 nm发射波长下轻松读取。荧光值与样本中的谷氨酰胺水平成正比。未知样本中的谷氨酰胺含量通过与标准曲线比较来确定。

相关产品  

1. MET-5151：S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）ELISA试剂盒  

2. MET-5152：S-腺苷甲硫氨酸（SAM）ELISA试剂盒  

3. STA-341：OxiSelect?过氧化氢酶活性检测试剂盒  

4. STA-344：OxiSelect?过氧化氢/过氧化物酶检测试剂盒  

试剂盒组成（蓝色冰袋运输）  

1. 谷氨酰胺酶（部件号51651D）：1瓶1 mL，浓度为2.5 U/mL。  

2. 阴性对照缓冲液（部件号51652B）：1瓶1 mL。  

3. 谷氨酸氧化酶（部件号267402）：1瓶160 ?L，浓度为5 U/mL。  

   注：1个单位定义为在pH 7.4、30°C条件下，每分钟从L-谷氨酸生成1.0微摩尔α-酮戊二酸的酶量。  

4. 谷氨酸丙酮酸转氨酶（部件号267403）：1瓶50 ?L，浓度为100 U/mL。  

   注：1个单位定义为在pH 7.5、25°C条件下，每分钟催化1.0微摩尔L-丙氨酸转氨的酶量。  

5. L-丙氨酸（部件号267404）：1瓶10 ?L，浓度为200 mM。  

6. L-谷氨酰胺标准品（部件号51653B）：1瓶100 ?L，浓度为10 mM。  

7. 荧光探针（部件号268101）：1瓶250 ?L，10 mM DMSO溶液，棕色瓶。  

8. 辣根过氧化物酶（HRP）（部件号234402）：1瓶100 ?L。  

9. 5倍检测缓冲液（部件号51654A）：1瓶50 mL，1 M醋酸钠缓冲液，pH 4.9。  

10. 5倍反应缓冲液（部件号51655A）：1瓶50 mL，1 M Tris缓冲液，pH 8.0。  

未提供材料  

1. 标准96孔黑色荧光微孔板和/或黑色细胞培养微孔板  

储存条件  

收到试剂盒后，将5倍检测缓冲液和5倍反应缓冲液在室温下保存。将谷氨酰胺酶、谷氨酸氧化酶和谷氨酸丙酮酸转氨酶分装后储存在-80℃。将其他所有组分分装后储存在-20℃。避免多次冻融循环。荧光探针对光敏感，必须妥善保存。

结果示例  

下图显示了典型的谷氨酰胺测定结果。应使用以下数据仅供参考。这些数据不应用于解释实际结果。

文献参考：

1. Brosnan JT (2003). J. Nutrition. 133: 2068S–2072S.

2. Votyakova TV, and Reynolds IJ (2001) Neurochem. 79:266-277.

3. Lacey JM and Wilmore DW (1990). Nutrition Rev. 48: 297–309.

4. Corbet C and Feron O (2015). Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care. 18: 346–353

5. Aledo JC (2004) BioEssays. 26 (7): 778–785.

6. Welbourne TC (1979). Canadian J. Biochem. 57: 233–237.

7. Abu Aboud O, Habib SL, Trott J, Stewart B, Liang S, Chaudhari AJ, Sutcliffe J, and Weiss RH(2017). Cancer Res. 77: 6746–6758.

Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈（San Diego），是有名的细胞学试剂品牌，作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的高端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。