一、产品概述
由艾美捷代理的Abnova推出的8-OHdG monoclonal antibody(克隆号:OHdG F5,货号:MAB6116)是一款小鼠来源的单克隆抗体,以 8-羟基-2‘-脱氧鸟苷(8-OHdG)与 KLH 的偶联物为免疫原制备而成。该抗体适用于免疫组织化学(IHC)检测,主要用于研究用途(RUO),不可用于临床诊断。
8-OHdG 是氧化性 DNA 损伤的经典生物标志物,由活性氧自由基攻击 DNA 中的脱氧鸟苷产生。该抗体能够特异性识别并捕获样本中的 8-OHdG,为氧化应激相关研究(如环境毒理学、癌症、神经退行性疾病、衰老等)提供可靠的免疫检测工具。
二、产品规格与基本信息
项目 具体信息
克隆名称 OHdG F5
宿主 小鼠
亚型 IgG1, kappa
免疫原 8-OHdG 与 KLH 偶联物
形式 冻干粉
缓冲体系 冻干前为 50 mM PBS,pH 7.4,含 1.0% BSA
应用 免疫组织化学(IHC)
推荐使用浓度 IHC:5–10 μg/mL IgG(具体需使用者优化)
储存条件 干态:< -20°C,干燥环境;复溶后:-20°C 或更低,分装保存,避免反复冻融
三、特异性优势:超低交叉反应
本抗体最显著的功能优势在于其极高的特异性。生产方针对 19 种 8-OHdG 类似物 进行了系统的交叉反应验证,结果如下:
3.1 无交叉反应的类似物(共 15 种)
以下类似物与抗体无任何交叉反应:
鸟苷(G)
7-甲基鸟苷(7-methyl-G)
6-巯基鸟苷(6-SH-G)
8-溴鸟苷(8-bromo-G)
脱氧腺苷(dA)
脱氧胞苷(dC)
脱氧胸苷(dT)
脱氧肌苷(dI)
脱氧尿苷(dU)
脱氧鸟苷(dG)
O6-甲基脱氧鸟苷(O6-methyl-dG)
8-羟基脱氧腺苷(8-OHdA)
鸟嘌呤(Gua)
O6-甲基鸟嘌呤(O6-methyl-Gua)
尿酸、尿素、肌酸、肌酐
3.2 存在微弱交叉反应的类似物(< 1%)
以下两种类似物表现出极微弱的交叉反应(均低于 1%),在实际应用中可视为可忽略不计:
8-巯基鸟苷(8-sulfhydryl-G)
8-羟基鸟嘌呤(8-OHGua)
结论:该抗体对 8-OHdG 具有高度专一性,能够有效区分 8-OHdG 与其结构相近的氧化嘌呤产物及其他核苷/碱基类似物。这一特性显著降低了免疫染色中假阳性信号的干扰,尤其适用于组织切片中低丰度 8-OHdG 的原位检测。
四、应用说明
4.1 主要应用:免疫组织化学(IHC)
本抗体已验证适用于 IHC 检测,可用于福尔马林固定、石蜡包埋组织切片或冰冻切片中 8-OHdG 的定位与半定量分析。推荐起始浓度为 5–10 μg/mL IgG,但最佳工作浓度可能因组织类型、固定条件、抗原修复方法及检测系统而异,需由使用者通过预实验梯度稀释确定。
4.2 未验证的应用
本产品目前仅针对 IHC 进行了验证。如需用于 ELISA、Western blot、免疫荧光或其他检测体系,使用者需自行评估其适用性。
五、操作与储存指南
5.1 冻干粉复溶
使用无菌蒸馏水复溶。具体体积请参照产品标签或随附说明书,通常建议复溶至适当浓度(如 0.5 mg/mL 或 1 mg/mL)。
复溶后应轻柔混匀,避免剧烈震荡产生气泡。
5.2 储存条件
冻干状态:在 < -20°C 干燥环境中储存,可长期稳定。
复溶后:应分装成单次使用量,储存于 -20°C 或更低温度。严禁反复冻融,否则可能导致抗体活性下降。
建议:将未稀释的复溶液分装于微量离心管中,每管用量足够一次实验即可。取用一管后剩余部分不应再次冷冻。
5.3 稳定性提示
抗体在推荐的储存条件下可保持稳定。避免暴露于高温、光照或微生物污染。如发现复溶后出现沉淀或浑浊,建议离心去除颗粒物后再使用。
六、功能优势总结
1. 超高特异性:经 19 种类似物验证,仅两种存在 < 1% 的微弱交叉,确保 IHC 染色结果的真实性。
2. 小鼠单克隆:批次间一致性高,可重复性好。
3. 冻干粉形式:便于运输与长期储存,复溶后活性稳定。
4. 即用型浓度指导:提供明确的 IHC 浓度范围(5–10 μg/mL),减少摸索时间。
5. 适用广泛:可检测多种生物样本(细胞、新鲜/冷冻组织、石蜡包埋组织)中的 8-OHdG。
七、研究应用场景举例
环境与职业医学:检测暴露于 PM2.5、重金属、农药等污染物后动物或人体组织中的氧化性DNA损伤。
放射生物学:评估电离辐射或紫外线照射后皮肤、造血组织等靶器官中 8-OHdG 的蓄积。
肿瘤病理学:分析癌前病变及恶性肿瘤中氧化应激水平,探讨 8-OHdG 与突变负荷的关系。
神经科学:在阿尔茨海默病、帕金森病模型中定位神经元 DNA 氧化损伤的分布。
心血管研究:检测动脉粥样硬化斑块或心肌缺血再灌注损伤区域中 8-OHdG 的表达。
八、注意事项
1. 研究用途限制:本产品仅限科研使用,不得用于人类或动物的诊断或治疗。
2. 优化必要性:建议使用者对每种新的组织类型进行抗体稀释梯度实验(如 2.5、5、10、20 μg/mL),并设置适当的阴性对照(如同型对照抗体或抗原预吸收对照)。
3. 抗原修复:对于石蜡包埋组织,通常需要进行热诱导抗原修复(如柠檬酸缓冲液微波修复),以暴露 8-OHdG 表位。具体修复条件需自行优化。
4. 防腐剂:本产品不含叠氮化钠(冻干缓冲液为 PBS/BSA),复溶时可酌情添加 0.02–0.05% 叠氮化钠用于短期保存(但若用于 IHC 染色,注意叠氮化钠会抑制 HRP 活性,应避免或彻底透析去除)。
文献参考:
1. Asymmetrical arginine dimethylation of histone H4 by 8-oxog/OGG1/PRMT1 is essential for oxidative stressinduced transcription activation. Wentao Wang, Ying Ma,Miaoling Huang, Weichu Liang, Xingqi Zhao, Qianwen Li, Shiwei Wang, Zhigang Hu, Lingfeng He, Tao Gao,Jinfei Chen, Feiyan Pan, Zhigang Guo. Free Radic Biol Med. 2021 Feb 20;164:175-186.
doi:10.1016/j.freeradbiomed.2020.12.457. Epub 2021 Jan 6.
2. SUMO2 regulates vascular endothelial function and oxidative stress in mice. Kim YR, Jacobs JS, Li Q,Gaddam RR, Vikram A, Liu J, Kassan M, Irani K, Kumar S. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2019 Dec 1;317(6):H1292-H1300.
doi:10.1152/ajpheart.00530.2019. Epub 2019 Oct 4.
3. Protection against pyrimidine dimers, p53, and 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine expression in ultravioletirradiated human skin by sunscreens: difference between UVB + UVA and UVB alone sunscreens. Liardet S, Scaletta C, Panizzon R, Hohlfeld P, LaurentApplegate L. J Invest Dermatol. 2001
Dec;117(6):1437-41.

微信扫码在线客服