一、产品概述
总抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity, TAC)是衡量生物样本或食品、饮料等物质中所有抗氧化剂综合作用的关键指标。抗氧化剂是一类能够减缓或阻止其他分子被氧化的物质,既包括谷胱甘肽、维生素等小分子,也包括过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶等大分子。由于氧化应激与阿尔茨海默病、帕金森病、糖尿病、类风湿关节炎及神经退行性疾病等多种疾病的发生发展密切相关,抗氧化剂在药理学、营养学及食品工业中的研究日益受到重视。
由艾美捷代理的BioAssay Systems 推出的本试剂盒(货号:DTAC-100)提供了一种 简单、直接、高通量 的总抗氧化能力检测方案,适用于血清、血浆、尿液、唾液、食品及饮料等多种样本类型。该检测方法基于铜离子(Cu??)被样本中抗氧化剂还原为亚铜离子(Cu?)的原理,后者与特异性染料试剂形成有色络合物,在 570 nm 波长处的吸光度与样本的总抗氧化能力成正比。结果以 Trolox(水溶性维生素E类似物)当量表示。
二、产品关键特性
特性 具体指标
样本用量 20 ?L
线性检测范围 1.5 – 1000 ?M Trolox 当量
检测方法 比色法,OD 570 nm
检测时间 20 分钟(孵育仅需 10 分钟)
检测通量 可自动化,每日处理数千样本
规格 100 次检测
检测限 1.5 ?M
保质期 6 个月
适用样本 血清、血浆、尿液、唾液、食品、饮料等
适用物种 所有物种
三、检测原理
本试剂盒采用改进型铜离子还原法。具体原理如下:
1. 样本中的抗氧化剂(包括亲水性和疏水性成分)将反应体系中的 Cu?? 还原为 Cu?。
2. 生成的 Cu? 与试剂盒提供的染料探针发生特异性螯合反应,形成稳定的紫色络合物。
3. 该络合物在 570 nm 波长处有特征吸收峰,吸光度值与样本中总抗氧化能力呈良好的线性关系。
4. 通过标准品(Trolox)制作标准曲线,即可计算出样本中总抗氧化能力的 Trolox 当量浓度(?M)。
与传统的 ABTS、DPPH 等方法相比,本方法不依赖自由基生成和清除,避免了自由基不稳定带来的批间变异,且对亲水和亲脂性抗氧化剂均有良好的响应,结果更具综合性。
四、试剂盒组分与储存
(具体组分以实际产品标签为准,以下为典型组成)
显色工作液:含 Cu?? 及染料试剂,1 瓶。
Trolox 标准品:1 管(浓度见标签)。
样品稀释液(可选):用于高浓度样本的稀释。
储存条件:所有组分于 2–8°C 避光保存。未开封试剂盒在有效期内稳定,有效期自生产之日起 6 个月。显色工作液如出现沉淀,可室温平衡后轻微摇动溶解,不影响使用。
五、检测限与线性范围
本试剂盒的检测下限(LOD)为 1.5 ?M Trolox 当量,线性范围覆盖 1.5 – 1000 ?M。对于超出上限的高抗氧化能力样本,可用样品稀释液适当稀释后重新检测,并将结果乘以稀释倍数。
六、应用场景
临床研究:评估糖尿病患者、心血管疾病患者或神经退行性疾病患者血浆中的总抗氧化状态,作为氧化应激的综合性指标。
药效评价:在药物开发中,筛选或验证候选化合物对机体 TAC 的改善作用。
营养学与食品科学:测定果蔬、茶叶、保健品、功能饮料等的总抗氧化活性,用于品质控制和标签声明。
毒理学:检测污染物或化学品暴露后实验动物组织中的 TAC 变化,评估氧化损伤程度。
食品工业:作为防腐剂和抗氧化添加剂的快速质控手段。
七、FAQ 补充说明
问:能否用于细胞裂解液?
答:可以,但细胞裂解液必须不含去垢剂(如 NP-40、Triton X-100)和还原剂(如 DTT)。推荐使用物理方法(反复冻融、超声)配合 PBS 进行裂解,离心后取上清检测。
问:高脂血症样本是否影响检测?
答:轻微脂浊对 570 nm 波长读数影响较小,但严重乳糜样本建议先进行高速离心(10,000 × g,10 分钟)去除脂质层,再取下层清液检测。
问:结果如何标准化?
答:对于血清/血浆,结果以 ?M Trolox 当量直接报告;对于组织或细胞样本,建议同时测定总蛋白浓度,结果以 ?M Trolox 当量 / mg 蛋白报告。
八、总结
本总抗氧化能力(TAC)比色法检测试剂盒提供了一种 快速(20 分钟)、灵敏(检测限 1.5 ?M)、线性范围宽(1.5–1000 ?M) 的检测方案。单次工作液添加和 10 分钟孵育使其具备超高通量能力,可轻松自动化。适用于血清、血浆、尿液、唾液、组织匀浆、食品及饮料等多种样本类型。使用者需特别注意避免去垢剂(Tween、Triton、NP-40)、还原剂(DTT、β-巯基乙醇)及金属螯合剂(EDTA)的干扰。本产品是基础研究、药物筛选、营养评估及食品质控中评估总抗氧化能力的可靠工具。
部分文献参考:
Halfen, DP et al. (2020). Evaluation of electrolyte concentration and pro-inflammatory and oxidative status in dogs with advanced chronic kidney disease under dietary treatment. Toxins, 12(1), 3. Assay: Antioxidant in canine serum.
Montoya, B et al. (2020). Does vitamin e supplementation enhance growth benefits of breeding helpers at no oxidative costs? Physiological and Biochemical Zoology: PBZ, 93(1): 37-48. Assay: Antioxidant in avian plasma.
Jeong, SB et al. (2020). Role of dietary gamma-aminobutyric acid in broiler chickens raised under high stocking density. Animal Nutrition, 6(3): 293-304. Assay: Antioxidant in chicken serum.

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