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Abbexa丨艾美捷代理DB3.1 化学感受态细胞,高效转化能力

发布者:艾美捷科技    发布时间:2025-09-30     
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一、产品概述

DB3.1 化学感受态细胞的基因型为:F-gyrA462 endA1△(sr1 - recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) supE44 ara - 14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(Sm R) xyl - 5 λleu mtl1。

Abbexa DB3.1 化学感受态细胞是专为DNA的化学转化而设计的。这种细胞含有 gyrA462 基因,能够抵抗 ccdB 基因产生的毒性效应,并且对链霉素具有抗性。该产品可用于转化和扩增含有 ccdB 基因的质粒,转化效率超过108cfu/ug DNA(经 pUC19 质粒 DNA 测试)。

产品规格为 1ml,包含 10×100ul 感受态细胞、20ul(0.1ng/ul)对照质粒 pUC19 和 10ml SOC 培养基。艾美捷作为Abbexa中国区代理商,为大家整理了一份DB3.1 化学感受态细胞中文说明书。

Abbexa

二、存储与使用说明

(一)存储条件

DB3.1 化学感受态细胞应存储于 - 70℃,最长可保存 6 个月。请勿在液氮中保存,避免反复冻融。

(二)使用说明

1. 准备材料:将水浴锅预热至 42℃。将 SOC 培养基或 LB 培养基置于室温下回温。将含抗生素的选择性平板在 37℃下预热 30 分钟。

2. 感受态细胞解冻:将 100ul DB3.1 化学感受态细胞置于冰上解冻。将 50ul 细胞分装至预冷的 1.5ml 离心管中,然后加入目标 DNA(1 - 5ul)。切勿通过反复上下移液来混合,将细胞置于冰上静置 30 分钟。

3. 热激处理:将细胞在 42℃下热激 45 秒,期间不要摇晃。热激完成后,立即将试管转移至冰上,静置 2 分钟,同样不要摇晃。

4. 细胞复苏:向试管中加入 500ul 预热的 SOC 培养基或 LB 培养基(不含抗生素),充分混匀后在 37℃、200rpm 的条件下振荡培养 1 小时,以促进细胞复苏和抗生素抗性基因的表达。

5. 涂布平板:从每个转化管中取 20 - 200ul 涂布于预热的选择性平板上。未涂布的细胞可在 4℃下保存,如有需要,第二天可继续涂布。

6. 平板培养:将平板倒置,置于 37℃下过夜培养。

7. 筛选与分析:挑选单菌落,通过限制性酶切、PCR 或测序等方法进行分析。

 

三、Abbexa-DB3.1 化学感受态细胞(abx098865)特点:

1. 高效的转化能力:DB3.1 化学感受态细胞的转化效率超过 108cfu/ug DNA,能够有效转化目标 DNA,为实验提供高效率的转化保障。

2. 抗性基因优势:该细胞含有 gyrA462 基因,使其能够抵抗 ccdB 基因产生的毒性,同时对链霉素具有抗性,这使得它在处理含有 ccdB 基因的质粒时具有独特的优势,避免了因毒性导致的转化失败,也方便在含有链霉素的培养基中筛选转化子。

3. 广泛的应用范围:适用于多种质粒的转化和扩增,为分子克隆、基因表达等实验提供了可靠的工具,尤其在涉及 ccdB 基因的实验中表现出色,为相关研究提供了便利。

 

四、注意事项

1. 仅限研究使用:本产品仅供研究使用,不得用于诊断、治疗、美容程序或人类及动物食用。

2. 运输与保存:产品在运输过程中会使用干冰。收到后请按照上述存储条件进行保存。

3. 操作建议:为了获得更高的转化效率,建议在感受态细胞解冻后立即进行转化操作,避免反复冻融。在整个实验过程中,所有样本和试剂都需要轻柔操作,以防止细胞受损或 DNA 降解。

4. 实验环境:确保实验环境的清洁和无菌,以避免杂菌污染,影响实验结果的准确性和可靠性。

 

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