一、产品概述
Abbexa人KHDC1类蛋白(KHDC1L)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人类组织匀浆、细胞裂解液及其他生物液体中人类KHDC1类蛋白(KHDC1L)浓度的试剂盒。该试剂盒基于酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,具有高特异性和灵敏度,适用于人类样本的检测。艾美捷作为Abbexa中国区代理商,为大家整理了一份人KHDC1类蛋白(KHDC1L)ELISA试剂盒中文说明书。
Abbexa人KHDC1类蛋白(KHDC1L)ELISA试剂盒(abx529898)基本信息
-目标蛋白:KHDC1类蛋白(KHDC1L)
-反应性:人类
-检测方法:比色法
-检测范围:0.156ng/ml-10ng/ml
-灵敏度:<0.07ng/ml
-标准品形式:冻干
-样本类型:组织匀浆、细胞裂解液及其他生物液体
-检测类型:定量
-检测方法:夹心法(Sandwich)
二、试剂盒组成
本试剂盒包含以下主要组分:
-预包被的96孔微孔板:预先包被有特异性抗体,用于捕获样本中的KHDC1L。
-标准品:用于建立标准曲线,以定量分析样本中的KHDC1L含量。
-标准品稀释缓冲液:用于稀释标准品溶液,以获得不同浓度的标准系列。
-洗涤缓冲液:用于在各步骤中清洗微孔板,去除未结合的成分,减少背景干扰。
-检测试剂A和B:用于夹心法检测,结合样本中的KHDC1L。
-稀释液A和B:分别用于稀释检测试剂A和B,确保其在合适的工作浓度下发挥作用。
-TMB底物:用于显色反应,其颜色变化与KHDC1L的含量呈正比关系。
-终止液:用于终止反应,使颜色变化固定,便于在特定波长下测量吸光度。
-封板膜:用于在反应过程中封闭微孔板,防止蒸发和交叉污染。
三、存储与有效期
-运输条件:试剂盒在运输过程中应保持在4℃。
-存储条件:收到后,请按照试剂盒说明书中的存储说明进行存储。建议存储于4℃。
-有效期:本试剂盒的有效期为6个月。
-稳定性:试剂盒的稳定性由活性损失率决定。在适当的存储条件下,有效期内的损失率小于5%。为减少性能波动,应严格控制操作流程和实验室条件。强烈建议整个实验过程由同一位用户完成。
四、实验原理
本试剂盒采用夹心ELISA技术。预先在96孔板上包被有特异性抗体。将标准品、测试样本加入到孔中并孵育,样本中的KHDC1L与包被抗体结合。随后加入检测试剂A和B,形成夹心复合物。加入TMB底物后,只有含有KHDC1L的孔才会产生蓝色产物,加入酸性终止液后会变为黄色。黄色的强度与结合在板上的KHDC1L量成正比。在微孔板读数仪上以450nm波长光谱光度法测量OD值,从而可以计算出KHDC1L的浓度。

五、实验步骤
1.设置标准、测试样本和对照孔:在预包被的微孔板上分别设置标准孔、测试样本孔和对照(零)孔,并记录它们的位置。建议每个标准和样本至少进行双份测量。
2.加样:向标准孔中加入50uL稀释后的标准品,向对照(零)孔中加入50uL标准品稀释缓冲液,向样本孔中加入50uL稀释后的样本。
3.加入检测试剂A:立即向每个孔中加入50uL检测试剂A工作溶液。用封板膜封住微孔板,在37℃下孵育1小时。
4.洗涤:移除封板膜,弃去溶液。用1X洗涤缓冲液洗涤微孔板3次。
5.加入检测试剂B:向每个孔中加入100uL检测试剂B工作溶液,封板后在37℃下孵育30分钟。
6.再次洗涤:弃去溶液,用洗涤缓冲液按前一步骤所述方法洗涤微孔板5次。
7.加入TMB底物:向每个孔中加入90uLTMB底物。用封板膜封住微孔板,在37℃下孵育10-20分钟。避免光照。孵育时间仅供参考,最佳时间应由最终用户确定。不要超过30分钟。
8.加入终止液:向每个孔中加入50uL终止液。立即在450nm波长下读取吸光度。
六、结果计算
本实验为夹心ELISA,样本中KHDC1L的浓度与其测量的吸光度呈正比关系。创建一个以标准浓度(y轴)和平均吸光度(x轴)为坐标的图表。通过标准点绘制最佳拟合趋势线。可以从标准曲线上插值计算出样本中KHDC1L的浓度。
七、注意事项
1.仅限研究使用:本产品仅供研究使用,不得用于诊断或治疗用途。
2.范围和灵敏度可能发生变化:范围和灵敏度可能会发生变化。
3.样本浓度要求:为获得准确结果,样本浓度必须稀释至试剂盒的中等范围内。
4.样本类型优化:请注意,Abbexa的试剂盒针对天然样本的检测进行了优化,而不是重组蛋白。Abbexa无法保证检测重组蛋白,因为它们可能具有与天然蛋白不同的序列或三级结构。
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