心肌细肌丝复合物，七组分精准化学计量比，还原天然细肌丝结构

产品描述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的心肌细肌丝复合物（Cardiac Thin Filament Complex, CTFC，货号TFC01）是由纯化心肌肌动蛋白（F-actin，货号AD99）与原肌球蛋白/肌钙蛋白复合物（货号TT05）在体外组装而成的高度有序多蛋白复合物。该复合物由六种蛋白以精确化学计量比组成：肌动蛋白：α-原肌球蛋白：β-原肌球蛋白：肌钙蛋白C：肌钙蛋白I：肌钙蛋白T = 7：1：1：1：1：1。组装完成后，细肌丝经100,000×g超速离心沉淀，重悬于反应缓冲液中，该步骤可纯化获得钙敏感性复合物。产品以白色冻干粉末形式供应。

应用方向

心肌细肌丝结合状态下钙激活肌球蛋白ATPase活性测定

靶向肌球蛋白/心肌细肌丝复合物的药物筛选与鉴定

纯度

蛋白纯度通过考马斯亮蓝染色的4-20%梯度聚丙烯酰胺凝胶扫描光密度法评估，心肌细肌丝复合物纯度>95%。

生物活性验证

CTFC的生物活性通过其调控肌球蛋白ATPase活性的能力进行验证。CTFC可重建包被细肌丝，其结构与肌纤维中的细肌丝类似。检测体系中以亚化学计量比加入肌球蛋白S1片段，以ATP和钙离子启动反应。

严格的质量控制标准确保：

无外源钙离子存在时，CTFC完全抑制肌球蛋白S1 ATPase活性

加入20uM钙离子后，肌球蛋白S1 ATPase活性恢复

其调控机制为：钙离子结合肌钙蛋白C，导致其从F-肌动蛋白上解离，解除空间位阻，允许肌球蛋白S1与肌动蛋白结合并启动ATP水解。需注意，高质量的肌球蛋白S1制剂是充分发挥CTFC性能的关键前提。

配套试剂

为便于用户开展完整实验，以下配套产品可供选择：

1. 心肌细肌丝复合物（1×1mg，货号TFC01）

2. 心肌肌球蛋白S1（0.25mg，货号MYS03）

3. ATPase检测生化试剂盒（货号BK051）

4. 100mM ATP溶于50mM Tris-HCl pH7.5（100uL）

5. PM12反应缓冲液（12mM Pipes-NaOH pH7.5，2mM MgCl?）

产品优势

CTFC是研究心肌收缩调控机制的理想体外模型，其核心优势体现在：

完整保留钙调控通路：包含完整的肌钙蛋白C/I/T三元复合物及原肌球蛋白，精准模拟心肌细丝钙依赖性开关机制

严苛的钙响应质控：无钙条件下完全抑制、加钙后完全激活，确保每批产品均具备高灵敏度钙响应能力

精确的化学计量比：七组分按天然比例组装，最大限度还原生理状态

冻干粉形式便于储存和运输，复溶后即保持生物学活性

*本产品仅供研究使用，不可用于诊断目的。

文献参考

1. J.M Murray. 1982. Hybridization and reconstitution of thethin filament. Methods Enzymol. 85: 15-17.

2. M.J. Holroyde et al. 1980. The calcium and magnesiumbinding sites on cardiac troponin their role in the regulationof myofibrillar adenosine triphosphatase. J. Biol. Chem.255: 11688-11693.