微管蛋白聚合检测试剂盒，支持神经元、HeLa、MCF-7等多类型微管蛋白，覆盖不同研究模型需求

检测概述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的微管蛋白聚合检测试剂盒（荧光法，>99%纯度微管蛋白）（货号：BK011P）是一种经济高效的一步法检测方案，用于评估药物或蛋白对微管蛋白聚合的影响。该方法基于Bonne,D.等描述的经典检测原理并加以优化，通过荧光探针在聚合过程中掺入微管而产生荧光增强信号，实时监测聚合进程。

标准检测采用神经元来源微管蛋白（货号T240），可生成包含微管形成三个典型阶段的聚合曲线：成核期（Phase I）、生长期（Phase II）和稳态平衡期（Phase III）。此外，该检测体系同样适配其他类型微管蛋白，如HeLa细胞微管蛋白（货号H001）和MCF-7细胞微管蛋白（货号H005）。

与微管蛋白相互作用的化合物或蛋白通常会改变聚合过程的一个或多个阶段特征。例如，抗有丝分裂药物紫杉醇在3?M终浓度下可消除成核期并提高生长期Vmax；而微管去稳定药物长春碱在3?M终浓度下则导致Vmax降低和最终聚合总量减少。因此，本试剂盒的重要应用之一即为新型抗有丝分裂药物的筛选发现。

主要应用

荧光法（激发360nm/发射420nm）实时监测微管蛋白聚合动态

靶向微管动力学的抗癌化合物高通量筛选

微管结合蛋白（MAPs）的功能表征

抗微管蛋白配体的IC50及EC50测定

试剂盒组分（96次测定用量）

微管蛋白（>99%纯度）

含荧光报告分子的微管缓冲液

微管甘油缓冲液

三磷酸鸟苷（GTP）

紫杉醇（聚合增强剂对照）

DMSO

半面积96孔黑色平底微孔板

详细操作说明书

需自备设备与材料

待测蛋白或化合物

-备温控功能的荧光酶标仪（激发360±20nm/发射420±20nm）

生物活性验证与性能参数

本试剂盒通过荧光报告分子在微管组装过程中掺入产生信号增强，实时监测微管蛋白聚合动力学，适用于研究微管装配与去装配的实时动态过程，对理解细胞功能及筛选药理学活性分子具有重要意义。

关键性能指标

荧光检测波长：激发360nm / 发射420nm

标准体系：每孔100ug微管蛋白，含15%甘油，96孔板，共96次测定

高通量优化体系：可适配384孔板，每孔20ug微管蛋白，共480次测定

反应体积：96孔板每孔50?L；384孔板每孔10uL

变异系数（CV）：≤11%

阳性对照品EC50（标准条件）：紫杉醇 0.49uM

阳性对照品IC50（标准条件）：长春碱 0.6uM

产品优势

本试剂盒将荧光检测的高灵敏度与一步法操作简便性相结合，用户无需进行放射性标记或繁琐的样品前处理。预配制试剂盒组分减少了实验变量，确保批次间结果一致性。同时，适配384孔板的能力显著降低了单孔试剂消耗量，适合高通量筛选场景。随附的紫杉醇和长春碱可作为体系性能验证的对照品，确保每批次实验数据可靠性。

*本产品仅供研究使用，不可用于诊断目的。

文献参考

1. Bonne, D., Heusele, C., Simon, C., and Pantaloni, D. 1985. 4’, 6-Diamidino-2-phenylindole, a fluorescent probe for tubulin and mictrotubules. JBC. 260 (5): 2819-2825.

2. Hyman AA, Middleton KM, Centola M, Mitchison TJ. and Carbon J. 1993. Microtubule-motor activity of a yeast centromere-binding protein complex. Nature. 359: 533-536.

3. Walker, R.A., Salmon, E.D., and Endow, S.A. 1990. The Drosophila claret segregation protein is a minus-end directed motor molecule. Nature. 347:780-782.

4. Amos LA. and Klug A. 1974. Arrangement of subunits in flagellar microtubules. J. CellScience. 14: 523-530