微管蛋白猪脑来源宽种属兼容性，支持跨物种靶蛋白互作研究

背景信息

微管蛋白由α-微管蛋白和β-微管蛋白两种密切相关的55kDa蛋白以异二聚体形式组成，二者分别由不同基因或小型基因家族编码，其序列在整个真核生物界高度保守。因此，从猪脑组织纯化的微管蛋白与绝大多数真核生物来源的微管蛋白具有高度同源性，可广泛用于检测来自不同物种的蛋白活性。微管蛋白聚合形成微管结构，初始聚合阶段先形成原丝，最终由13根原丝组装成直径25nm的微管，每微米微管长度约包含1650个异二聚体。微管是高度有序的结构，具有内在极性。

产品描述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的微管蛋白（猪脑来源，>99%纯度）（货号：T240）采用改良Shelanski法从猪脑中纯化微管蛋白，并进一步经阳离子交换层析精制，纯度>99%。产品以冻干粉形式供应，经SDS-PAGE鉴定为单一条带（55kDa），功能性异二聚体分子量为110kDa。冻干粉可常温运输，4°C干燥保存。

应用方向

微管蛋白配体的IC50及EC50测定

微管蛋白/微管相关蛋白（MAPs）的表征

HDAC6相关研究

纯度

蛋白纯度通过考马斯亮蓝染色的12%聚丙烯酰胺凝胶扫描光密度法评估，纯度>99%。

生物活性验证

每批产品的生物活性通过微管蛋白聚合检测进行评估，该方法通过监测340nm处吸光度变化追踪微管形成。在标准检测条件下（5mg/mL微管蛋白，体系含通用微管缓冲液、5%甘油及1mM GTP，总体积180?L，37°C，光径0.8cm），OD340应在30分钟内达到0.78至1.1之间。

储存与复溶

冻干粉储存：4°C干燥环境下可保存1年；亦可于-70°C干燥保存。

复溶操作：

1. 使用补充1mM GTP的通用微管缓冲液（80mM PIPES pH 6.9，2mM MgCl?，0.5mM EGTA）将冻干粉复溶至10mg/mL

2. 按单次实验用量分装

3. 使用液氮速冻后于-70°C保存

复溶后保存：-70°C可稳定保存6个月。关键注意事项：复溶后的微管蛋白在-70°C保存前必须使用液氮速冻，否则将导致活性显著丧失。

*本产品仅供研究使用，不可用于诊断目的。

文献参考

1. Amos, LA. & Klug A. 1974. J. Cell Sci. 14: 523-530.

2. Shelanski ML, et al. 1973. Proc. Natl. Acad. Science USA. 70:765-768