猪脑微管蛋白（生物素标记），低空间位阻，专为链霉亲和素体系优化

产品概述

微管蛋白（Tubulin）是真核细胞骨架系统的核心组分，由α和β两种分子量约为55 kDa的紧密相关蛋白组成异二聚体。这两种蛋白由独立的基因或小基因家族编码，其序列在真核生物界中高度保守。因此，从猪脑组织中分离的微管蛋白与大多数真核来源的微管蛋白具有高度同源性，这一特性赋予了猪脑微管蛋白一个重要的技术优势：可用于检测来自多种不同物种的蛋白质。微管蛋白聚合后形成微管（Microtubules, MTs），聚合过程中首先形成原丝，13条原丝组成直径约25 nm的微管结构。每微米微管长度由1650个异二聚体构成。微管是具有内在极性的高度有序结构。

产品描述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的猪脑微管蛋白（生物素标记）（货号T333P）为生物素标记的猪脑微管蛋白，适用于以下应用场景：荧光或电子显微镜下微管的生物素标记及后续检测、微管固定化实验、体外重构实验，以及微管结合蛋白（MAPs）的鉴定与表征。

标记方法

本品以未修饰的微管蛋白T240为原料，采用长链生物素酯对随机表面赖氨酸进行标记。延长的间隔臂可确保生物素不会干扰链霉亲和素结合等下游应用。标记效率约为每个微管蛋白异二聚体连接1–2个生物素分子。产品以白色冻干粉形式提供。

纯度

产品纯度通过12%聚丙烯酰胺凝胶上考马斯蓝染色蛋白的扫描光密度法评估，确定纯度大于99%。在4–20%聚丙烯酰胺凝胶上检测，T333P被确定为>99%微管蛋白（分子量55 kDa）。

生物活性

生物素化微管蛋白保持高生物活性，经离心沉降实验证实，体外条件下>80%可聚合形成微管，其性能与未修饰微管蛋白相当。

储存与复溶

冻干产品的推荐储存条件为4°C、湿度<10%，在此条件下可稳定保存6个月。冻干蛋白也可在-70°C干燥条件下保存5个月。复溶前，先短暂离心使蛋白产品聚集于管底。使用2 ?l冰预冷的通用微管蛋白缓冲液（货号BST01，含80 mM PIPES pH 6.9、2 mM MgCl₂、0.5 mM EGTA）并补充1 mM GTP（即G-PEM），将微管蛋白复溶至10 mg/ml。轻轻吹打两次后置于冰上2分钟使蛋白溶解。10 mg/ml的微管蛋白可用液氮速冻保存，冻存液在-70°C下可稳定保存6个月。工作浓度可通过G-PEM或含5%甘油的G-PEM进一步稀释（体外应用推荐含5%甘油）。复溶后的T333P必须在-70°C储存前用液氮速冻；若未进行此步骤，将导致活性显著丧失。

注意事项

为确保实验可重复性，建议严格按照上述复溶与储存流程操作，尤其注意速冻步骤不可省略。产品仅供科研使用。