罗丹明标记猪脑微管蛋白，体外微管动力学研究的优质工具

产品概述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的Tubulin protein (rhodamine): porcine brain（Cat. #TL590M）是一种罗丹明荧光标记的微管蛋白制剂，来源于猪脑组织。微管蛋白由α-微管蛋白和β-微管蛋白两个高度同源的55 kDa亚基组成异二聚体，这两个亚基由不同基因编码，其序列在整个真核生物中高度保守。因此，猪源微管蛋白与绝大多数真核生物来源的微管蛋白具有高度同源性，可用于检测源自多种物种的蛋白质相互作用，具有良好的技术通用性。

微管蛋白聚合形成微管结构：聚合起始阶段先形成原丝，每根微管由13根原丝组成，直径为25 nm，每微米微管长度包含约1650个异二聚体。微管具有高度有序的结构和内在极性，是细胞骨架的重要组成部分。

核心性能参数

参数 | 指标

激发波长（Ex） | 547 nm

发射波长（Em） | 576 nm

光谱范围 | 橙色

标记化学 | 随机表面赖氨酸经活化酯偶联

标记计量比 | 每异二聚体约1-2个染料分子

蛋白纯度 | >99%（考马斯亮蓝染色SDS-PAGE扫描光密度法）

聚合活性 | >80%（沉降法验证）

剂型 | 冻干粉末

关键特性

1. 高纯度

经12%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和考马斯亮蓝染色后，通过扫描光密度法评估蛋白纯度，确定为>99%，确保实验结果的可靠性和可重复性。

2. 高生物学活性

TL590M微管蛋白保留高生物学活性，经沉降法验证，超过80%的微管蛋白能够在体外聚合形成微管，其性能与未修饰微管蛋白相当，确保下游实验结果的生理相关性。

3. 稳定的荧光标记

罗丹明染料通过活化酯偶联于微管蛋白表面赖氨酸残基，每异二聚体标记约1-2个荧光分子，在保证足够信号强度的同时，最大限度减少染料对蛋白功能的影响。

主要应用方向

体外驱动蛋白运动性分析：作为荧光标记微管底物，实时追踪驱动蛋白沿微管的运动

微管动力学研究：体外观察微管聚合与解聚动态过程

微管相关蛋白（MAPs）及药物效应分析：评估MAPs或微管靶向药物对微管动力学的影响

物种通用性优势

由于微管蛋白序列在真核生物中高度保守，猪脑来源的微管蛋白可广泛适用于检测来自不同物种的蛋白质样本，在药物筛选和跨物种对比研究中尤为便利，避免了物种特异性差异带来的实验偏差。

储存与操作建议

冻干粉末请于-80°C长期保存。复溶时推荐使用适当的缓冲液（如PEM缓冲液：100 mM PIPES、1 mM EGTA、1 mM MgCl?，pH 6.8）配制成适宜浓度的储存液。建议分装保存，避免反复冻融。荧光标记蛋白需避光保存，防止荧光淬灭。

文献参考

1. Amos, L.A. & Klug A. 1974. J. Cell Sci. 14:523-530

2. Shelanski M.L. et al. 1973. Proc. Natl. Acac. Sci. USA. 70:765-768.

3. Piehl M. and Cassimeris L. 2003. Organization and dynamics of growing microtubule plus ends during early mitosis.Mol. Biol. Cell 14: 916-925.

4. Hyman A.A. et al. 1992. Microtubule motor activity of ayeast centromere-binding complex. Nature 359: 533-536.