牛心肌原肌球蛋白/肌钙蛋白复合物，保留完整钙离子响应功能，适用于体外细丝重构

产品概述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的原肌球蛋白/肌钙蛋白复合物（Tropomyosin/Troponin Complex，Cat. #CS-TT05）是从牛心肌组织中纯化获得的天然多蛋白复合物。该复合物由五种蛋白质按照等摩尔比（1:1:1:1:1）组成：原肌球蛋白α、原肌球蛋白β、肌钙蛋白C、肌钙蛋白I和肌钙蛋白T。这些蛋白共同构成了肌肉收缩调控的核心分子机器，是研究横纹肌兴奋-收缩耦联机制的关键工具。

该复合物以白色冻干粉末形式供应，经考马斯亮蓝染色SDS-PAGE扫描光密度法鉴定，纯度>85%，且通过特异性抗体验证确认五种组分蛋白均完整存在。

核心性能参数

参数 | 指标

来源 | 牛心肌组织

组分 | 原肌球蛋白α、β；肌钙蛋白C、I、T

组分比例 | 1:1:1:1:1（等摩尔比）

纯度 | >85%（SDS-PAGE/光密度法）

剂型 | 白色冻干粉末

验证 | 各组分经特异性抗体确认

结构与功能机制

在骨骼肌和心肌中，肌钙蛋白-原肌球蛋白复合物定位于肌动蛋白细丝上，是钙离子依赖性肌肉收缩调控的核心元件。其调控机制如下：

条件 | 状态 | 分子事件

无钙离子 | 抑制状态 | 原肌球蛋白遮蔽肌动蛋白上的肌球蛋白结合位点；肌钙蛋白I抑制ATP酶活性，肌肉松弛

有钙离子（~10 uM） | 激活状态 | Ca²⁺结合肌钙蛋白C → 构象变化传导至肌钙蛋白I → 原肌球蛋白位移 → 肌球蛋白结合位点暴露 → ATP酶活性恢复 → 肌肉收缩

生物学活性验证

CS-TT05的生物活性通过F-肌动蛋白激活的肌球蛋白ATP酶活性调控实验进行验证。该检测体系模拟生理条件下细丝调控功能，具体标准为：

无钙条件下：复合物有效抑制肌球蛋白ATP酶活性

添加钙离子后（~10 uM）：ATP酶活性显著恢复

活性验证确保每批次产品均具备完整的调控功能，适用于下游功能学实验。

主要应用方向

组装肌动蛋白细丝：与纯化肌动蛋白共同组装成含调控蛋白的细丝结构

药物靶点筛选：作为肌球蛋白/细丝复合物靶向药物的识别和评估平台

肌肉调控机制研究：钙离子依赖性收缩调控的体外模型

储存与复溶指南

项目 | 条件

冻干粉储存 | 4°C干燥避光（湿度<10%），有效期1年

复溶方法 | 加入冰预冷Milli-Q水，配制成3 mg/ml

复溶后缓冲体系 | 20 mM PIPES pH 7.0，25 mM KCl，5%（w/v）蔗糖，1%（w/v）葡聚糖

复溶后储存 | 分装后液氮速冻，-70°C保存，有效期6个月

操作要点：

复溶前短暂离心，使粉末聚集于管底

按单次实验用量分装，避免反复冻融

全程保持低温操作

严禁反复冻融，每次取用须速冻回存

物种来源优势

牛心肌来源的调控蛋白复合物与哺乳动物系统高度同源，在药物筛选和功能研究中具有良好的相关性和可转化性，尤其适用于心血管药物开发和心肌疾病机制研究。

文献参考

1. J.M Murray. 1982. Hybridization and reconstitution of thethin filament. Methods in Enzymology, 85, p.15-17.

2. M.J. Holroyde et al. 1980. The calcium and magnesiumbinding sites on cardiac troponin their role in the regulationof myofibrillar adenosine triphosphatase.