QKine重组人角质细胞生长因子(FGF-7)蛋白(Qk046)的应用和活性检测分析

角质细胞生长因子（KGF），也称为成纤维细胞生长因子-7（FGF-7），是大FGF家族的一部分，与FGF-3、FGF-10和FGF-22一起，是FGF-7亚家族的成员。该亚家族仅由间充质分泌，并特异性激活存在于上覆上皮中的FGFR1（FGFR1b）和FGFR2（FGFR2b）的“b”亚型[1]，这些受体的KGF通过FGFR2的IIIb剪接形式起作用。KGF是肾脏、胸腺和海马发育所必需的[2]。KGF在伤口愈合中也起着重要作用[3]，这一作用在生物工程皮肤研究中得到了体现[3]。KGF蛋白已被用于产生许多类器官，包括肺、乳腺、肝脏和膀胱[2]。

Qkine人FGF-7/KGF是一种高纯度、生物活性19kDa的蛋白质，不含动物来源（AOF）和载体蛋白（CF）。

艾美捷QKine重组人角质细胞生长因子(FGF-7)蛋白(Qk046)：

摘要：高纯度FGF-7/KGF蛋白（UniProt编号：P21781）

纯度 >98%，通过SDS-PAGE定量密度分析测定

分子量：19 kDa

表达系统：大肠杆菌（E. coli）

无动物源成分（AOF）且无载体蛋白

在英国剑桥的实验室生产

冻干自PBS缓冲液

复溶方法：在水中复溶至>100 ?g/ml，制备单次使用分装，如需可添加载体蛋白，然后在-20℃或-80℃冷冻保存

推荐应用：

气道、乳腺、肝细胞和泌尿道类器官培养

进一步质量检测：

质谱分析：单一物种，具有预期质量

内毒素：<0.005 EU/?g蛋白（低于检测水平）

从原瓶回收率：>95%

FGF-7（KGF）活性测定

使用Promega血清反应元件荧光素酶报告基因检测（*）在转染的MCF-7细胞中测定FGF-7（KGF）活性。细胞用KGF的系列稀释液处理4小时（每组三个重复）。通过测量萤火虫荧光素酶活性并归一化到对照组的海肾荧光素酶活性来评估。EC?? = 92 pM（1.75 ng/mL）。数据来自Qk046批次#104314。*Promega pGL4.33[luc2P/SRE/Hygro] #E1340

SDS-PAGE分析

在非还原（NR）条件下，KGF蛋白以19 kDa单体和38 kDa二聚体形式迁移；在还原（R）条件下，迁移为19 kDa。未见其他污染蛋白条带。3 ?g纯化重组蛋白通过15%（w/v）SDS-PAGE在还原（+β-巯基乙醇，R）和非还原（NR）条件下分离，并用考马斯亮蓝R250染色。数据来自Qk046批次#104314。

文献参考：

Generation of human iPSC-derived pancreatic organoids to study pancreas development and disease

bioRxiv preprint on 25 October 2024 by Darrigrand, J. et al.

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