Acti-stain 555鬼笔环肽，从宽场到超分辨，实现固定细胞与组织肌动蛋白的稳定成像

产品概述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的Acti-stain 555鬼笔环肽（货号：PHDH1）是一种高亲和力的F-肌动蛋白荧光探针，适用于固定细胞和组织中肌动蛋白细胞骨架的精确可视化。该产品偶联了明亮且光稳定的荧光基团，能够提供清晰、低背景的染色效果，是荧光显微镜和定量成像的理想选择。

关键特性

激发/发射波长：Ex 550 nm / Em 570 nm（橙色光谱）

特异性：特异性结合F-肌动蛋白，解离常数（Kd）为20 nM

信号质量：低背景、高亮度、信号稳定

经济性：每管可配制≥70 ml 1×工作液

剂型：冻干粉

兼容性：适用于宽场显微镜、共聚焦显微镜及超分辨率显微镜技术，包括PAINT、SIM、STORM及其他SMLM方法

纯度：≥90%（HPLC检测）

应用范围

固定细胞和组织的荧光染色

体外荧光肌动蛋白丝的制备

背景介绍

鬼笔环肽是从毒鹅膏菌（*Amanita phalloides*）中提取的一种七氨基酸肽类毒素，能特异性且高亲和力地结合聚合形式的肌动蛋白（F-肌动蛋白），Kd值为20 nM。鬼笔环肽可将肌动蛋白聚合的临界浓度降低至1 ?g/ml以下，从而起到聚合增强剂的作用。本产品采用专有红色荧光染料标记，可用于组织培养细胞、组织切片及无细胞制剂的肌动蛋白丝染色。Acti-stain 555鬼笔环肽标记的肌动蛋白丝保留了未标记肌动蛋白的许多功能特性，包括与肌球蛋白相互作用的能力。

储存与复溶

1. 短暂离心，使产品收集于管底。

2. 用500 ul 100%甲醇复溶，配制成14 ?M溶液。

3. 建议将溶液分装后储存于-20°C，可稳定保存6个月。

4. 冻干粉在4°C干燥条件下（湿度<10%）可稳定保存6个月。

实验所需试剂

1. Acti-stain? 555鬼笔环肽（Cat. PHDH1）

2. 生长于玻璃盖玻片上的半汇合Swiss 3T3细胞

3. F-肌动蛋白染色试剂盒（Cytoskeleton公司，Cat. BK005）或自行配制下列试剂4-7

4. 磷酸缓冲盐溶液（PBS：20 mM磷酸钾，pH 7.4，150 mM NaCl）

5. 固定液（3.7%多聚甲醛/PBS，pH需调至7.0）

6. 通透液（0.5% Triton X-100/PBS）

7. 抗淬灭封片剂（Fluka BioChemika，Cat. #10981）

8. 100 nM DAPI（PBS配制）

9. 玻璃显微镜载玻片（25 × 75 × 1 mm）

10. 盖玻片密封液（透明指甲油）

生物活性验证

Acti-stain? 555的生物活性通过鬼笔环肽特异性染色3T3细胞中肌动蛋白丝的能力来验证。

注意事项

本产品仅用于科研用途。使用前请仔细阅读说明书，严格按照推荐条件储存和操作，以确保实验结果的可靠性和重复性。

文献参考

1. Fluorescent dye is sold under license from Anaspec.

2. Wulf, E. et al. (1979). Proc Natl Acad Sci USA. 76(9):4498-4502.3. Kron, S.J. et al. (1991). Meth. Enzmol. 196: 399-416.