Acti-stain 488绿色荧光鬼笔环肽低背景、高光稳定性，兼容宽场至超分辨全平台成像

产品概述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的Acti-stain 488 phalloidin（Cat. #PHDG1）是一种高亲和力F-肌动蛋白绿色荧光探针，由鬼笔环肽（Phalloidin）与专有绿色荧光染料偶联而成。鬼笔环肽来源于毒鹅膏菌（*Amanita phalloides*），是由七个氨基酸组成的环肽毒素，能够以极高亲和力（Kd = 20 nM）特异性结合聚合态肌动蛋白（F-actin），而对单体肌动蛋白（G-actin）无结合能力。该探针是肌动蛋白抗体的理想替代品，标记后的肌动蛋白丝仍保留与肌球蛋白相互作用等功能特性。

核心性能参数

参数 | 指标

激发波长（Ex） | 500 nm

发射波长（Em） | 520 nm

光谱范围 | 绿色

亲和力（Kd） | 20 nM

纯度 | ≥90%（HPLC）

剂型 | 冻干粉末

关键特性

1. 高特异性F-肌动蛋白标记

对聚合态肌动蛋白（F-actin）具有高度选择性，Kd值达20 nM，仅结合F-actin而不结合G-actin，确保染色结果的特异性和准确性。与许多肌动蛋白抗体不同，Acti-stain 488在不同物种间结合无显著差异，具有良好的物种通用性。

2. 明亮且光稳定的荧光信号

偶联专有高亮度绿色荧光染料，具有优异的光稳定性，信号持久，非特异性背景极低，适用于定量成像分析。

3. 成本经济

每瓶用量充足，可配制≥70 ml 1x工作液，适合多次实验使用。

4. 广泛的成像平台兼容性

除常规宽场和共聚焦显微镜外，还兼容多种超分辨成像技术，包括：

PAINT（点累积纳米级拓扑成像）

SIM（结构光照明显微镜）

STORM（随机光学重建显微镜）

其他单分子定位显微技术（SMLM）

5. 适用样本类型

适用于组织培养细胞、组织切片及无细胞制品的肌动蛋白丝特异性标记，可用于固定细胞和组织的荧光染色，也可用于体外荧光肌动蛋白丝的制备。

生物学活性验证

Acti-stain 488的生物活性通过在3T3细胞中特异性标记肌动蛋白丝的能力进行验证，确保每批次产品的染色性能可靠。

鬼笔环肽的作用机制

鬼笔环肽不仅特异性结合F-actin，还能将肌动蛋白聚合的临界浓度降低至1 ug/ml以下，从而作为聚合增强剂稳定肌动蛋白丝结构。这一特性使其在制备稳定荧光肌动蛋白丝时尤为有用。

应用方向

固定细胞与组织切片的荧光染色：特异性标记F-actin，低背景荧光，无需多物种特异性优化

体外荧光肌动蛋白丝的制备：制备稳定、标记的肌动蛋白丝用于下游实验

超分辨显微成像：支持PAINT、SIM、STORM等高分辨率成像技术

定量成像分析：明亮稳定的信号适合基于荧光强度的定量分析

产品优势总结

与许多肌动蛋白抗体相比，Acti-stain 488 phalloidin具有以下独特优势：

仅结合F-actin，不结合G-actin，背景荧光极低

物种通用性，不同来源样本间结合无显著差异

无需二抗，一步染色即可完成标记，操作简便

信号稳定，光漂白抗性优于多数荧光抗体

储存与操作指南

项目 | 条件

冻干粉储存 | 4°C干燥避光（湿度<10%），有效期6个月

复溶方法 | 加入500 ul 100%甲醇，配制成14 uM储存液

储存液保存 | -20°C避光保存，有效期6个月

操作步骤：

1. 收到产品后，短暂离心使冻干粉末聚集于管底

2. 加入500 ul 100%甲醇复溶，配制成14 uM储存液

3. 建议按单次实验用量分装，避免反复冻融

4. 分装后于-20°C避光保存

注意事项：

笔环肽具有毒性，操作时请佩戴适当防护装备

甲醇溶液需妥善处理，废弃处置须遵守当地法规

使用前请将分装的储存液恢复至室温并充分混匀

荧光标记蛋白需全程避光操作，防止荧光淬灭

文献参考

1. Fluorescen dye is sold under license from Anaspec.

2. Wulf, E. et al. (1979). Proc Natl Acad Sci USA. 76(9):4498-4502.

3. Kron, S.J. et al. (1991). Meth. Enzmol. 196: 399-416.