肌动蛋白聚合生化检测试剂盒--多场景肌动蛋白调控效应评估平台

产品概述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的肌动蛋白聚合生化检测试剂盒（荧光法）（Cat. #BK003）是一款基于荧光检测原理的肌动蛋白聚合/解聚生化检测试剂盒。该试剂盒利用芘标记肌动蛋白在聚合过程中产生的荧光增强效应，实时监测肌动蛋白单体（G-actin）聚合成纤维状肌动蛋白（F-actin）的动态过程，也可用于研究预形成F-actin的解聚。该试剂盒适用于评估组织提取物、纯化蛋白或化合物对肌动蛋白聚合与解聚的调控作用，是细胞骨架功能研究的高效工具。

核心检测原理

该试剂盒的核心检测原理基于芘标记肌动蛋白的荧光增强特性：芘标记的G-actin（单体形式）在聚合形成F-actin（纤维形式）时，荧光信号发生显著增强，增强幅度可达4-6倍。这种荧光变化可通过荧光酶标仪在动力学模式下实时追踪，从而精确反映肌动蛋白聚合/解聚的进程和速率。同样，利用预形成的芘标记F-actin，可监测解聚过程。

核心性能参数

参数 | 指标

检测方法 | 动力学荧光增强法

激发/发射波长 | Ex: 350±20 nm / Em: 407±10 nm

信号增强幅度 | 单体→纤维：4-6倍荧光增强

检测通量 | 30-100次（根据实验设计）

检测时长 | 约3小时

适用样本 | 纯化蛋白、组织提取物、化合物

关键特性

1. 实时动力学监测

通过荧光信号的时间依赖性变化，可实时追踪聚合/解聚全过程，获取初始速率、达到稳态的时间、稳态F-actin水平等多维度动力学参数。

2. 多种实验应用场景

该试剂盒支持以下五种实验类型：

应用场景 | 检测目的

评估效应物 | 检测组织提取物、ABP或化合物对聚合反应的定性/定量影响

评估成核因子 | 检测F-actin成核蛋白、化合物或提取物的促聚合效应

评估切割蛋白 | 检测F-actin切割蛋白、化合物或提取物对稳态F-actin水平的影响

评估解聚效应 | 检测ABP、化合物或提取物对预形成F-actin的解聚作用

临界浓度测定 | 在不同实验条件下测定肌动蛋白聚合的临界浓度

3. 组分灵活复用

试剂盒组分可单独用于其他基于肌动蛋白的实验，如沉降法检测F-actin结合蛋白或尺寸排阻色谱法鉴定G-actin结合蛋白。

实验关键注意事项

肌动蛋白对实验条件较为敏感，需要ATP和二价阳离子维持其稳定性。若忽视这一点，极易获得错误数据并导致实验解读偏差。本试剂盒的设计全程引导操作者正确完成聚合/解聚研究的每一步，确保数据的可靠性和可重复性。

试剂盒组分

芘标记兔骨骼肌肌动蛋白

通用肌动蛋白缓冲液

肌动蛋白聚合缓冲液

ATP

Tris-HCl pH 7.5

96孔板

生物学活性验证

BK003的生物活性通过芘标记肌动蛋白的聚合荧光增强效应进行验证，确保每批次产品具有一致的聚合活性。试剂盒的检测性能在多种标准条件下经过充分验证，实验数据可靠。

所需配套设备

设备/材料 | 规格要求

荧光酶标仪 | 具备动力学模式，Ex: 350±20 nm，Em: 407±10 nm

超速离心机 | 150,000 g，4°C，适配100-500 ul离心管

目的蛋白或化合物 | 纯化形式（不建议直接使用细胞裂解物）

应用优势总结

快速经济：约3小时即可获得聚合/解聚效应的定性定量结果

灵活便捷：试剂盒提供完整实验方案，适合初次接触该领域的研究者

高灵敏度：芘荧光标记提供4-6倍信号增强，检测灵敏度优异

多场景适用：支持聚合促进、解聚促进、稳态调节等多种功能评估