Epigentek丨艾美捷代理货号：P-9009 MethylFlash 5-mC RNA甲基化ELISA简易试剂盒荧光法表观转录组学研究的新标杆

在表观遗传学快速发展的今天，RNA修饰作为新的研究前沿正受到越来越多的关注。其中，5-甲基胞嘧啶（5-mC）作为RNA中重要的表观遗传标记，在基因表达调控中发挥着关键作用。MethylFlash 5-mC RNA甲基化ELISA简易试剂盒荧光法货号：P-9009基于成熟的MethylFlash定量技术平台，为科研人员提供了一套完整的解决方案，能够快速、准确地定量分析各种生物来源的RNA中的5-mC甲基化水平。

Epigentek集团公司是创新技术和表观遗传学相关研究产品的开发商和供应商。公司开发了包括400多个专利产品的全面的产品组合，为表观遗传学方面的研究和新药研发提供全面系统的解决方案。各界备受推崇的学者、制药企业以及先进的生物技术公司都在使用Epigentek产品。相比普通方法的产品而言，这些独特的产品在科研分析过程中更简单、更快捷、更方便、更有效。

技术原理与创新突破

该试剂盒采用创新的荧光检测原理，基于高亲和性的核酸结合技术和特异性抗体识别系统，实现了对RNA中5-mC修饰的精准定量。其核心技术在于将RNA片段与经过特殊处理的条带式微孔板结合，这些微孔板具有极高的核酸亲和性，能够有效捕获RNA样品。

检测过程中，通过特异性捕获抗体和检测抗体识别5-mC修饰位点，随后通过微孔板分光光度计读取荧光强度进行定量分析。5-mC RNA的比例与测量的荧光强度成正比，这种直接的定量关系确保了检测结果的准确性和可靠性。整个检测流程仅需2小时40分钟即可完成，大大提高了实验效率。

准确定量各种5-mC含量使用MethylFlash 5-mC RNA甲基化ELISA试剂盒（荧光）。结果密切相关与MS-LC获得的结果一致。

优质的性能特点

该试剂盒在多个技术指标上展现出显著优势：

优质的灵敏度：检测限可低至200ng输入RNA中0.02%的5-mC水平，这一灵敏度足以检测样品中微量的RNA甲基化变化，为研究低丰度修饰提供了可能。

出色的特异性：对5-mC具有高度特异性，在规定的RNA浓度范围内与未甲基化胞嘧啶或羟甲基化胞嘧啶无交叉反应，确保了检测结果的准确性。

操作便捷性：固有的低背景噪声特性消除了平板封闭步骤的需要，简化了操作流程。条带式微孔板设计既适用于手动操作，也能满足高通量分析的需求。

广泛的适用性：阳性对照和阴性对照的设置使得该试剂盒能够检测任何物种的5-mC RNA甲基化，包括哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒等。

准确的定量能力：经过优化的阳性对照可按百分比分级，使检测结果更加准确，与HPLC-MS分析结果具有高度可比性。

在表观转录组学研究中的重要意义

5-甲基胞嘧啶在DNA中的存在已经得到广泛研究，通常与基因表达的抑制相关。然而，在人类细胞中，5-mC也出现在各种RNA分子中，包括tRNA、rRNA、mRNA和非编码RNA。研究表明，5-mC在某些类别的ncRNA中似乎较为富集，但在mRNA中相对较少。

在动物基因组中，5-mC的水平存在很大差异，从某些昆虫中几乎无法检测到的水平，到人类细胞中约占总RNA的0.1-0.45%不等。大多数（83%）5-mC位点被发现存在于mRNA中。在这些转录本中，5-mC在蛋白质编码序列中似乎较为缺乏，但在5'和3'非翻译区（UTR）中较为富集。

目前已知两种不同的甲基转移酶NSUN2和Dnmt2能够催化真核生物RNA中的5-mC修饰。有充分证据表明，RNA胞嘧啶甲基化影响多种生物学过程的调控，如RNA稳定性和mRNA翻译。此外，vault RNA中5-mC的缺失会导致异常加工成与Argonaute相关的小RNA片段，这些片段可以起到microRNA的功能。因此，vault ncRNA的加工受损可能有助于理解与NSun2缺陷相关的人类疾病的病因学。

实验要求与技术规范

该试剂盒对起始材料的要求明确：输入RNA应具有高纯度，260/280比值＞2.0，且相对无DNA污染。可使用DNase I去除DNA，RNA应洗脱在无RNase的水中。每个反应的RNA量可在50ng至300ng之间，建议使用200ng RNA，这是获得最佳结果的优化输入量。

试剂盒适用于各种来源的RNA样品，包括但不限于培养细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织、血浆/血清样本和体液样本等。这种广泛的适用性使其成为多学科研究的理想工具。

技术创新与应用前景

该试剂盒的技术创新主要体现在四个方面：检测速度的优化、信号窗口的扩大、操作流程的简化和检测灵敏度的提升。这些改进使得研究人员能够更快速、更准确地获得可靠的5-mC RNA甲基化数据。

在基础研究领域，该试剂盒为探索RNA甲基化在细胞分化、发育和疾病发生中的作用提供了重要工具。在临床研究方面，5-mC RNA甲基化水平的异常变化可能与多种疾病状态相关，这为疾病诊断和预后评估提供了潜在的生物标志物。

特别是在精准医疗快速发展的背景下，该试剂盒的高通量特性使其能够适应大规模样本分析的需求，而其优质的灵敏度则使其在珍贵样本研究中具有独特价值。随着单细胞测序技术和空间转录组学的发展，对低起始量样品中RNA修饰的研究需求日益增长，该试剂盒的技术特点正好满足这一发展趋势。

质量保证与可靠性

试剂盒的稳定性和可靠性通过严格的质量控制得到保证。大信号窗口设计和重复样品间的较小变异确保了实验结果的一致性和可重复性。与HPLC-MS分析结果的高度可比性进一步验证了该技术的准确性。

在表观转录组学研究方法学快速发展的今天，该试剂盒为研究人员提供了一个经过验证的、可靠的技术平台。其优质的性能指标和广泛的应用范围，使其成为探索RNA甲基化生物学功能的理想工具。

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