组蛋白是生物体中染色质的主要蛋白质成分。它们作为DNA缠绕的“线轴”,并且在基因调控中发挥作用。核心组蛋白包括H2A、H2B、H3和H4。组蛋白会经历后翻译修饰,这些修饰会改变它们与DNA和核蛋白的相互作用。H3和H4组蛋白具有从核小体突出的长尾,这些尾部可以在多个位点上发生共价修饰(例如甲基化、乙酰化、磷酸化等)。组蛋白修饰参与多种生物学过程,如基因调控、DNA修复和染色体凝聚(有丝分裂)。人们认为多种修饰的组合构成了“组蛋白密码”,理解这一密码可能有助于回答有关人类发育和疾病的问题。
艾美捷EpiQuik总组蛋白提取试剂盒(#OP-0006-100)是一套完整的优化缓冲液和试剂,用于从哺乳动物细胞或组织中提取总核心组蛋白(H2A、H2B、H3和H4),整个过程仅需60分钟。提取的组蛋白保留了后翻译修饰(PTM),因此可以与Epigentek的组蛋白修饰检测试剂盒或用于组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、SUMO化、泛素化、瓜氨酸化和ADP-核糖化研究的各种下游应用配合使用。
EpiQuik总组蛋白提取试剂盒优势:
预优化且简单的1小时协议
方便地包含了进行组蛋白提取所需的所有必需试剂
标准化程序,可获得可重复的结果
从低至1 mg的组织中提取高产量的总核心组蛋白
保留后翻译修饰
不影响组蛋白修饰状态或水平
原理与操作:
EpiQuik总组蛋白提取试剂盒仅需将我们专有的组蛋白分离缓冲液应用于细胞或组织样本。经过预裂解、裂解和平衡缓冲液处理后,总核心组蛋白可以轻松提取,用于即时使用或在适当条件下储存。
起始材料:
起始材料的最小量可以低至105个细胞或1 mg组织。为了获得最佳结果,细胞数量应大于106个细胞,或组织量应大于10 mg。使用本试剂盒可以进行100次标准提取(每次提取使用107个细胞或100 mg组织)。总组蛋白的产量约为每107个细胞或100 mg组织0.4 mg。产量可能会因细胞或组织类型而异。
实验数据:
左图:使用EpiQuik总组蛋白提取试剂盒从MCF-7细胞中制备组蛋白提取物,并使用EpiQuik全局乙酰化组蛋白H3K9定量试剂盒(比色法)(产品编号P-4010)定量乙酰化组蛋白H3-K9。
右图:使用EpiQuik总组蛋白提取试剂盒制备的组蛋白提取物的SDS-PAGE分析,每泳道加载10 ?g样本(共18个样本)。
微信扫码在线客服