在表观遗传学研究领域,DNA甲基化作为最重要的调控机制之一,对基因表达和细胞分化具有深远影响。MethylFlash全球DNA甲基化(5-mC)ELISA简易试剂盒比色法货号:P-1030作为第四代技术创新产品,为科研人员提供了一种快速、准确检测全基因组DNA甲基化水平的完整解决方案。
Epigentek集团公司是创新技术和表观遗传学相关研究产品的开发商和供应商。公司开发了包括400多个专利产品的全面的产品组合,为表观遗传学方面的研究和新药研发提供全面系统的解决方案。各界备受推崇的学者、制药企业以及先进的生物技术公司都在使用Epigentek产品。相比普通方法的产品而言,这些独特的产品在科研分析过程中更简单、更快捷、更方便、更有效。
技术原理与创新突破
该试剂盒基于创新的"一步式"ELISA样反应原理,通过特异性检测5-甲基胞嘧啶(5-mC)的含量,实现全基因组DNA甲基化状态的比色定量分析。其核心技术突破在于将复杂的DNA甲基化检测流程简化为一个高效、可靠的操作体系。
检测过程中,DNA片段首先与经过特殊处理的微孔板结合,这些微孔板具有极高的DNA亲和性。随后,通过捕获抗体和检测抗体特异性识别甲基化DNA片段,最后通过微孔板分光光度计读取吸光度进行定量分析。甲基化DNA的比例与测量的OD值强度成正比,这种直接相关的定量关系确保了检测结果的准确性。

准确定量各种5-mC含量使用MethylFlash全球DNA甲基化(5-mC)ELISA简易试剂盒(比色法)。结果非常接近与HPLC-MS获得的结果相关。
优质的性能优势
该试剂盒在多个技术指标上展现出显著优势:
高效快速:经过优化的操作步骤使得整个检测流程仅需2小时即可完成,相比基于LUMA、LINE-1、Alu或LTR的检测方法具有明显的速度优势。
优质的灵敏度:检测限可低至100ng输入DNA中0.05%的甲基化水平,这一灵敏度足以检测样品中微量的DNA甲基化变化。
出色的特异性:对5-mC具有高度特异性,在指定DNA浓度范围内与未甲基化胞嘧啶和羟甲基胞嘧啶无交叉反应,确保了检测结果的可靠性。
操作便捷性:固有的低背景噪声特性消除了DNA变性和平板封闭步骤的需要,大大简化了操作流程。条带式微孔板设计既适用于手动操作,也满足高通量分析的需求。
准确的定量能力:经过优化的阳性对照可按百分比分级,使检测结果更加准确,与HPLC-MS分析结果具有高度可比性。
在表观遗传学研究中的重要意义
DNA甲基化是通过DNA甲基转移酶在胞嘧啶环5-碳位共价添加甲基基团而形成的,产生5-甲基胞嘧啶(5-mC)。在体细胞中,5-mC几乎完全存在于CpG二核苷酸的配对对称甲基化环境中,而在胚胎干细胞中,大量5-mC也出现在非CpG环境中。
动物基因组中5-mC的水平存在很大差异,从某些昆虫中几乎无法检测到的水平,到脊椎动物中约占总DNA的2%不等。植物中5-mC的水平通常占总DNA的0.5-2%,而在其他某些物种中可高达8%。5-mC作为表型变异和基因表达的重要表观遗传修饰,其生物学重要性已得到广泛认可。
全基因组5-mC含量降低(DNA低甲基化)可能是由多种环境影响导致的甲基缺乏引起的,并已被提议作为癌症等多种生物学过程的分子标志。研究表明,全基因组DNA甲基化的降低是癌症最重要的特征之一。
实验操作与技术要求
该试剂盒对起始材料的要求相对宽松:输入DNA应具有相对纯度,260/280比值>1.6,可使用水或TE缓冲液进行稀释。每个反应推荐的DNA使用量为100ng,这是获得最佳结果的优化输入量。
试剂盒适用于从哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒等多种物种中分离的DNA,样品来源包括但不限于培养细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织、血浆/血清样本和体液样本。同时适用于200bp至全长的单链和双链DNA。
技术优势与研究应用
该试剂盒的一个显著特点是专门优化了与MethylFlash全基因组DNA羟甲基化(5-hmC)ELISA简易试剂盒(比色法)的配对使用,使得研究人员能够同时定量检测甲基化DNA和羟甲基化DNA。这一特性为研究DNA甲基化与羟甲基化之间的动态平衡提供了独特的技术支持。
在转化医学研究中,该试剂盒显示出重要的应用价值。研究表明,全基因组DNA甲基化水平的变化与多种疾病状态密切相关。特别是在肿瘤研究中,DNA低甲基化被认为是癌症发生的重要早期事件。该试剂盒的高灵敏度使其能够检测到这些早期变化,为疾病诊断和预后评估提供了潜在的工具。
同行评价与市场认可
来自科研界的反馈充分证明了该试剂盒的优质性能:"对于低5-mC含量(<0.5%)的样品,我认为Epigentek是最佳选择";"我推荐您使用我们在实验室优化的Epigentek新试剂盒——MethylFlash全基因组DNA甲基化(5-mC)ELISA简易试剂盒";"MethylFlash试剂盒确实是我尝试过的最佳产品"。这些评价从实践层面验证了该试剂盒的可靠性和优越性。
技术前景与发展方向
随着表观遗传学研究的深入,对DNA甲基化检测技术的需求日益增长。MethylFlash试剂盒的技术创新主要体现在四个方面:速度的提升、操作流程的简化、检测灵敏度的提高以及结果可重复性的增强。这些改进使得该试剂盒能够更好地满足现代生物医学研究对高效、精准检测的需求。
特别是在精准医疗和个性化治疗快速发展的背景下,该试剂盒为研究人员探索疾病发生发展的表观遗传机制提供了强有力的工具。其广泛的应用范围和高度的可重复性,使其成为基础研究和临床研究中的重要技术支撑。
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作为Epigentek 的独家代理,艾美捷科技为中国客户提供包括DNA甲基化研究工具、染色质结构分析、组蛋白甲基化研究、乙酰化与去乙酰化分析、DNA损伤与修补、组蛋白磷酸化、蛋白泛素化等系列研究试剂盒和抗体产品等全系列解决方案。
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