甲基基团的添加是由一类酶,即 DNA 甲基转移酶(DNMTs 或 DNA MTases)完成的。基因启动子附近的染色质结构也会影响 DNA 甲基化和转录活性。DNMT1、DNMT3A 和 DNMT3B 是建立和维持 DNA 甲基化模式所必需的。另外两种酶,DNMT2/TRDMT1 和 DNMT3L,可能具有更专门但相关的功能。DNMT1 似乎负责维持已建立的 DNA 甲基化模式,而 DNMT3A 和 3B 似乎介导新或从头开始的 DNA 甲基化模式的建立。研究表明,DNMT2/TRDMT1 可在 C38 处甲基化 tRNAAsp,而 DNMT3L 是一种催化失活的 DNA 甲基转移酶调节因子,对 DNMT3A 和 DNMT3B 的功能至关重要。癌细胞等病变细胞可能有所不同,因为单独的 DNMT1 并非维持异常基因高甲基化所必需的,DNMT1 和 DNMT3B 可能共同承担这一功能。
EpiQuik? DNMT(DNA 甲基转移酶)活性/抑制超敏检测试剂盒是一套完整的经过优化的缓冲液和试剂,使实验者能够在 96 孔条板上通过比色法以极快速度测量 DNA 甲基转移酶活性或抑制。该试剂盒即用型,提供了进行成功的 DNMT 活性/抑制实验所需的所有基本成分,无需放射性或任何特殊设备。EpiQuik DNMT 活性/抑制超敏检测试剂盒是其广受欢迎的前代试剂盒的进一步改进,通过增强样本信号和显著降低背景信号,灵敏度提高了五倍。
艾美捷EpiQuik DNMT活性/抑制测定超试剂盒(比色法)(#P-3009-48)优势与特点:
1、比色法检测,操作步骤简便,方便快捷。整个操作流程可在 3 小时 45 分钟内完成。
2、安全创新的比色法检测,无需放射性、萃取和色谱法。
3、超灵敏检测限可低至 0.5 ?g 核提取物或 0.5 ng 纯化酶,比前代试剂盒提高了五倍。
4、优化的抗体和增强溶液对 5 - mC 具有高特异性,对未甲基化的胞嘧啶无交叉反应。
5、条带式微孔板格式适用于低通量或高通量分析。
6、EpiQuik 核提取试剂盒也已针对该试剂盒进行了优化。
EpiQuik DNMT 活性与抑制比色法检测:
(a) 使用重组 DNMT1 与 EpiQuik DNMT 活性/抑制超敏检测试剂盒(比色法)实现高灵敏度和特异性。
(b) 使用核提取物与 EpiQuik DNMT 活性/抑制超敏检测试剂盒(比色法)实现高灵敏度和特异性。核提取物是使用 EpiQuik 核提取试剂盒(产品编号 OP-0002)从 MCF-7 细胞中制备的。
文献引用:
Rahman MM et. al. (December 2024). Combinatorial phenethyl isothiocyanate and withaferin A targets multiple epigenetics pathways to inhibit MCF-7 and MDA-MB-231 human breast cancer cells. Cancer Cell Int. 24(1):422.
Yung WS et. al. (November 2024). DNA Hypomethylation Is One of the Epigenetic Mechanisms Involved in Salt-Stress Priming in Soybean Seedlings. Plant Cell Environ.
Negi CK et. al. (September 2024). Triphenyl Phosphate Alters Methyltransferase Expression and Induces Genome-Wide Aberrant DNA Methylation in Zebrafish Larvae. Chem Res Toxicol. 37(9):1549-1561.
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