产品概述
由艾美捷代理Epigentek推出的BisulFlash DNA 修饰试剂盒(货号:P-1026-050)是一套完整的优化缓冲液与试剂组合,采用 Epigentek 开发的快速 DNA 亚硫酸氢盐转化技术进行 DNA 修饰,专为甲基化特异性 PCR(MSP)以及基于亚硫酸氢盐转化的 NGS 应用而设计。通过专有组分使 DNA 变性与亚硫酸氢盐转化同时进行,整个流程缩短至仅 30 分钟。此外,该试剂盒可防止 90% 以上的 DNA 损失,并将未甲基化胞嘧啶完全转化为尿嘧啶。
完善的亚硫酸氢盐转化
传统方法需先进行单独的变性步骤,再进行亚硫酸氢钠 DNA 转化步骤;而 BisulFlash 方法在整个 DNA 亚硫酸氢盐转化过程中持续维持 DNA 变性状态。这一突破性方法使 DNA 转化过程显著加快,并具有更高的转化效率和准确性。BisulFlash 试剂盒通过明确亚硫酸氢盐转化的四个关键要素实现创新:
速度:整个流程缩短至仅 30 分钟,无需任何试剂配制时间。
效率:将未甲基化胞嘧啶完全转化为尿嘧啶——修饰 DNA 转化率 >99.9%。
DNA 保护:防止 DNA 降解,可避免 90% 以上的 DNA 损失,实现更高回收率。
灵敏度:最低仅需 0.2 ng 或 50 个细胞的输入 DNA 即可进行修饰。
便捷的即用型 DNA 转化混合液和单温度孵育,结合上述特点,使亚硫酸氢盐转化达到真正的完善。该试剂盒适用于 MS-PCR/MSP 和实时 MSP。
原理与操作流程
作为下一代亚硫酸氢盐转化工具,BisulFlash DNA 修饰试剂盒包含对 DNA 样本进行超快速亚硫酸氢盐转化所需的全部试剂。借助即用型转化混合液,DNA 变性状态在整个亚硫酸氢盐 DNA 转化过程中得以维持。该专有溶液使亚硫酸氢盐试剂能够快速将所有胞嘧啶转化为尿嘧啶,而甲基胞嘧啶转化可忽略不计。混合液中独特的 DNA 保护试剂可防止 DNA 在亚硫酸氢盐处理过程中发生化学和热降解。无毒 DNA 捕获溶液使 DNA 紧密结合到柱滤膜上,从而可在柱上进行 DNA 清洗,有效去除残留的亚硫酸氢盐和盐分。
快速结果
整个 BisulFlash? 流程——从转化样本 DNA 到获得纯化的亚硫酸氢盐修饰 DNA——仅需 30 分钟。这比目前使用的任何试剂盒(2–8 小时)或自配方法(>16 小时)都显著更快。该试剂盒提供成功完成亚硫酸氢盐转化和 DNA 清洗所需的一切,以最短时间和最少步骤实现目标。
完美的 DNA 转化
每个 BisulFlash? 反应可使用 0.2 ng–1 ?g DNA。为获得最佳转化效果,DNA 用量为 50–200 ng。新型流程和专有即用型 DNA 转化混合液使 DNA 变性和亚硫酸氢盐转化同时发生,将所有胞嘧啶转化为尿嘧啶(>99.9%),而 5-甲基胞嘧啶保持不变。使用实时 PCR 扩增转化 DNA 时获得的低 CT 值证明了高效的胞嘧啶转化。这一完美转化率优于市场上其他亚硫酸氢盐试剂盒,为下游分析提供可重复且可靠的结果。
强大的 DNA 保护
DNA 转化混合液中添加了 DNA 保护试剂,可防止 DNA 在亚硫酸氢盐处理过程中发生化学和热降解,并提供有效的 DNA 变性,产生完全胞嘧啶转化所需的单链 DNA。防止 DNA 降解使后续大 PCR 片段的扩增和分析成为可能。高效整合的 DNA 清洗和独特洗脱缓冲液使转化后的 DNA 可长期储存(>6 个月)并多次冻融而不影响 DNA 质量。
应用价值
该试剂盒是 DNA 甲基化研究的核心样本前处理工具,适用于 MSP、实时 MSP、亚硫酸氢盐测序(BSP)、焦磷酸测序及亚硫酸氢盐转化后的 NGS 全基因组甲基化分析等应用。其 30 分钟超快速流程显著提升实验效率,>99.9% 的转化率和 90% 以上的 DNA 回收率确保下游数据的可靠性,0.2 ng 的超低起始量使其特别适合微量样本或稀有细胞研究。即用型试剂与单温度孵育设计降低了操作误差,是表观遗传学研究中高效、稳定的亚硫酸氢盐转化解决方案。
文献参考
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