EpiNext CUT&LUNCH RNA免疫沉淀（RIP）试剂盒，无需交联实现体内互作真实还原

产品概述

由艾美捷代理Epigentek推出的EpiNext CUT&LUNCH（Cleavage Under Target and Liberate Unique Nucleic Complex Homogeneously）RNA 免疫沉淀（RIP）试剂盒（货号：P-2037）提供了一种快速、高效的体内蛋白质-RNA 相互作用研究方法。它整合了目前常用的 RIP 技术与改良 CUT&RUN（一种用于蛋白质-DNA 相互作用分析的新方法）的全部优势，具有以下特点：

极速三步流程：直接从完整细胞起始，无需裂解和交联。整个检测流程可在 1 小时 50 分钟内完成，最大限度减少 RNA 损伤及解离 RNA 结合组分的丢失，保留天然蛋白质-RNA 结构。

增强特异性、最小化背景：独特的核酸切割酶通过切割或去除目标蛋白/RNA 复合物两端的 RNA 序列，确保低序列偏好性，同时不影响目标蛋白占据的 RNA。游离的非特异性蛋白质-RNA 复合物被选择性清除，仅回收抗体结合的复合物。因此，可可靠地实现目标蛋白富集区域的高分辨率定位与鉴定。

低输入材料：未结合 RNA 的强力切割与免疫捕获均在同一单管中完成。该方法兼容细胞和组织样本，可最大程度保护目标蛋白并减少样本损失。输入细胞量可低至 20,000 个细胞，仅为传统 RIP 最低需求量的不到 5%。

广泛适用性：适用于培养细胞以及来自不同物种的新鲜和冷冻组织，可研究多种 RNA 结合蛋白，同时保持检测的特异性和灵敏度。

高度便捷：试剂盒包含所有必需组分，使 EpiNext CUT&LUNCH RIP 试剂盒兼具便捷性与成本效益。

背景知识

体内蛋白质复合物 RNA 的富集结合 qPCR 和/或下一代测序，是研究表观转录组范围蛋白质-RNA 相互作用的有利工具。长期以来用于实现该目标的主要方法是传统 RIP（RNA 免疫沉淀）结合 PCR（RIP-PCR）或测序（RIP-Seq）。这些方法虽被广泛使用，但无法实现高分辨率，需要交联，且重复性差、流程复杂。尤其耗时（8 小时至 2 天）且成本高昂。

原理与操作流程

该试剂盒提供富集 RNA 结合蛋白特异性 RNA 复合物所需的全部试剂，可通过 qRT-PCR 或 NGS 对多种细胞样本中的蛋白质-RNA 相互作用进行分析。检测中，细胞被透化处理后，与针对目标蛋白的 RIP 级抗体孵育。随后，独特的核酸切割酶混合物选择性切割目标蛋白区域侧翼的 RNA 序列，去除非特异性 RNA-蛋白质复合物，仅选择性保留抗体结合的复合物。捕获的蛋白质/RNA 复合物中的 RNA 片段经纯化后，可直接用于 qRT-PCR 或 cDNA 文库构建，以分析蛋白质与 RNA 之间的相互作用。

起始材料

起始材料可包括多种哺乳动物细胞样本，如来自培养瓶或培养板的培养细胞、原代细胞，或从血液、体液、新鲜/冷冻组织中分离的稀有细胞群，以及从整个细胞群和胚胎细胞中分选出的特定细胞等。

应用价值

该试剂盒是研究 RNA-蛋白质相互作用的核心工具，适用于表观转录组学、RNA 结合蛋白功能研究、mRNA 加工与稳定性调控机制探索，以及疾病相关 RNA 结合蛋白异常分析。其 1 小时 50 分钟的极速流程显著优于传统 RIP 的 8 小时至 2 天，20,000 个细胞的超低起始量使其特别适合稀有细胞样本研究。无需交联和裂解的设计保留了天然蛋白质-RNA 结构，高分辨率定位能力则为下游 qRT-PCR 和 NGS 分析提供可靠数据。单管操作与完整试剂配置进一步提升了实验效率与成本效益，是蛋白质-RNA 相互作用研究的高效解决方案。