NanoTag-抗Halo标签蛋白单域抗体-Halo标签融合蛋白的高特异性检测

抗Halo标签单域抗体 (sdAb anti-Halo) 是一种内部研发的单域抗体（sdAb），可特异性结合HaloTag。它能够实现Halo标签融合蛋白的高特异性检测，并且通常与Halo配体同时结合兼容。

HaloTag(1)技术是分子和细胞生物学中广泛使用且高度通用的平台，可用于详细分析蛋白质功能、动力学和分子相互作用。该技术基于一种经基因工程改造的细菌卤代烷脱卤酶，其被修饰后可与合成的Halo配体形成特异且稳定的共价键。这些配体可被多种功能基团修饰，包括荧光团、生物素和亲和标签，从而在活细胞成像、蛋白质纯化和生化分析中实现多样化应用。

与传统的Halo配体不同，抗Halo单域抗体（克隆1A12）识别HaloTag表面暴露的表位，并且通常与Halo配体同时结合兼容，因此在多重应用中保持HaloTag系统的功能完整性。

艾美捷抗Halo标签蛋白单域抗体：

货号：N5005-Biotin

克隆号：1A12

宿主：羊驼

生产系统：大肠杆菌

应用：ELISA、免疫荧光（IF）

抗原：HaloTag

靶点：HaloTag

特异性：特异性识别HaloTag，未发现与其他蛋白质的交叉反应。

制剂：DBCO和生物素偶联的sdAb（C端1:1标记）从PBS pH 7.4中冻干。未偶联的sdAb从10 mM KPi、150 mM NaCl、1 mM EDTA pH 6.0中冻干。使用250 uL纯水复溶后立即使用，或用250 uL 50%甘油复溶后于-80°C储存。

分子量：14.9 kDa

消光系数：20128

运输条件：常温

存储条件：含冻干试剂的西林瓶可在2-8°C下保存12个月。复溶后，可在-80°C下保存6个月。工作 aliquots 可在-20°C下保存4周。

注意：仅限体外/研究使用。无毒、无危害性、无传染性。

通过生物层干涉技术（BLI）使用链霉亲和素生物传感器，对固定化的抗Halo单域抗体克隆1A12（生物素化，5μg/mL）与Halo标签分析物（20-0.3125 nM）之间的相互作用进行动力学分析。结合和解离阶段（彩色轨迹）采用1:1结合模型进行全局拟合（黑线）。所得动力学参数显示其具有高亲和力结合特性：结合速率常数kon=(2.96±0.17)×10? M??s??，解离速率常数koff=(5.21±0.01)×10?? s??，对应的平衡解离常数KD=176.9±0.2 pM。

参考文献：

Los GV, Encell LP, McDougall MG, et al. HaloTag: a novel protein labeling technology for cell imaging and protein analysis. ACS Chem Biol. 2008;3(6):373-382. doi:10.1021/cb800025k