一种能够识别mNeonGreen(mNG)的单域抗体(sdAb),mNeonGreen是一种源自文昌鱼(Branchiostoma lanceolatum)的明亮的单体绿色荧光蛋白。
mNeonGreen是一种非常明亮的单体绿色荧光蛋白,当作为细胞中的荧光探针表达时,它相对成熟得较快。正因为如此,自2013年被发现以来,mNeonGreen在生物科学领域受到了广泛关注。它是从文昌鱼中发现的野生型蛋白衍生出来的合成版本。
目前可用的最新变体可以在荧光蛋白数据库“fpbase”中找到开源数据库。
货号:N3205-BIOTIN
克隆号:1E2
宿主:羊驼
生产:大肠杆菌
应用:
免疫荧光(ICC)
免疫组化(IHC)
注意:不推荐用于Western blot检测蛋白,因为sdAbs主要识别天然/折叠蛋白。
靶标:mNeonGreen
特异性:识别mNeonGreen。不与任何GFP、dsRed或TagBFP衍生物发生交叉反应。
配方:
DBCO和生物素偶联的sdAb(C末端1:1标记)从pH 7.4的PBS中冻干。未偶联的sdAb从5 mM KPi pH 6.0、300 mM NaCl、0.5 mM EDTA pH 6.0中冻干。用250 ?L纯去离子水复溶后可立即使用,或用250 ?L无菌50%甘油复溶后在-80°C下保存。
kDa:16.8
消光系数:35598
运输:常温
储存:含有冻干试剂的安瓿可在2-8°C下保存长达12个月。复溶后,在-80°C下保存长达6个月。工作分装液可在-20°C下保存长达4周。
注意事项:仅用于体外/研究。无毒、无危害、无传染性。
实验示例:

用FluoTag-X2抗mNeonGreen(sdAb抗mNeonGreen与荧光团偶联)对表达TOM70-mNeonGreen融合蛋白的PFA固定Cos7细胞进行免疫染色。FluoTag信号以绿色表示,DAPI染色的细胞核以蓝色显示。
文献参考:
Deutz LN, Sar?kaya S, Dickinson DJ. Membrane extraction in native lipid nanodiscs reveals dynamic regulation of Cdc42 complexes during cell polarization. Biophys J. Published online November 23, 2023. doi:10.1016/j.bpj.2023.11.021 (N3205-Biotin; Table S1; Microfluidic devices/coverslips coating for TIRF microscopy)
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