sdAb抗mScarlet-i是一种自主研发的单域抗体(sdAb),能够以高亲和力和特异性识别mScarlet变体(包括-i、H和3)。
mScarlet背景与特性
mScarlet是通过体外合成多种红色荧光蛋白的共识模板创建的(参考文献)。它是目前已知最亮的(大约比mCherry亮3倍)且真正的单体荧光蛋白之一,非常适合用于细胞成像(FPbase)。mScarlet通常有两种不同的版本,每个版本都带有一个独特的单氨基酸替换:mScarlet-I(T74I),其成熟速度更快;mScarlet-H(M164H),其光稳定性更高。目前可获得的最新变体可以在开源的荧光蛋白数据库“fpbase”中找到。
NanoTag的纳米抗体特异性且强烈地结合多种mScarlet变体(已验证包括mScarlet-I、mScarlet-H和mScarlet-3)。
货号:N1305-BIOTIN
克隆:2B12
宿主:羊驼
生产于:大肠杆菌
应用:免疫荧光(IF)
使用注意事项:本品不推荐用于Western blot检测蛋白,因为sdAb主要识别天然/折叠蛋白。
抗原:mScarlet-i
靶标:mScarlet-i、mCherry
特异性:在天然构象下识别mScarlet-i和mScarlet-3。与一些mRFP衍生的红色荧光蛋白(如mCherry)发生交叉反应。
配方:DBCO和生物素偶联的sdAb(C端1:1标记)是从pH 7.4的PBS中冻干的。
未偶联的sdAb是从5 mM KPi pH 6.0、300 mM NaCl、0.5 mM EDTA pH 6.0中冻干的。
HRP偶联的sdAb是从HRP保护缓冲液中冻干的,应使用200 uL纯水复溶后在4°C下保存,或使用200 uL高纯度无菌50%甘油复溶后在-80°C下保存。
复溶:
用250 uL纯去离子水复溶后立即使用。
用250 uL无菌50%甘油复溶后在-80°C下保存。
运输:常温
储存:含有冻干试剂的安瓿可在2-8°C下保存长达12个月。复溶后,在-80°C下保存长达6个月。工作分装可在-20°C下保存长达4周。
注意事项:仅用于体外/研究目的。无毒、无害、无传染性。
示例应用:
A. 用4%多聚甲醛固定的COS7细胞表达TOM70-nfScarlet融合蛋白(nf:非荧光)的灰度图像,使用FluoTag-X2抗mScarlet-i与Atto 488偶联(产品编号N1302-At488,稀释比例1:500)进行染色。
B. A图的假彩色表示,显示为绿色(根据所用荧光团的激发波长进行着色)。
C. 所描绘部分的相应DAPI信号。
D. A和C的合并图像。A的假彩色表示为绿色,C为蓝色。
文献参考:
Masullo LA, Kowalewski R, Honsa M, et al. Spatial and stoichiometric in situ analysis of biomolecular oligomerization at single-protein resolution. Nat Commun. 2025;16(1):4202. Published 2025 May 6. doi:10.1038/s41467-025-59500-z (ICC/IF; DNA-PAINT; Exchange-PAINT; CHO cells)
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