QA-Bio-α-半乳糖苷酶的切割方案

大肠杆菌来源的α-半乳糖苷酶能够从复杂碳水化合物和糖蛋白中切割α(1-3)和α(1-6)连接的非还原末端半乳糖。它对α(1-4)连接的半乳糖没有活性。当pH值必须保持中性或更高时，例如在活细胞中，它特别有效地去除α连接的半乳糖。

对于切割β-半乳糖苷酶，推荐使用肺炎链球菌来源的β-(1-4)半乳糖苷酶（E-BG07），或者是从牛睾丸中纯化的β-(1,3,4,6)半乳糖苷酶（E-BG02）。

艾美捷QA-Bio-α-半乳糖苷酶：

货号：LZ-ACASE-KIT

来源：通过在大肠杆菌中重组表达

内容物：50 mM 磷酸钠，pH 7.5中的α-半乳糖苷酶

包含在20 μL和60 μL包装规格中：

5倍反应缓冲液 – 250 mM 磷酸钠，pH 6.5

比活性：>30 U/mg

活性：80 U/ml

分子量：~80,000 道尔顿

建议用法：

向管中加入高达100 μg的糖蛋白或1 nmol的寡糖。

加水至13 μL。

加入4 μL 5倍反应缓冲液。

加入2 μL α(1-3,6)半乳糖苷酶。

在37°C下孵化1小时。

注意：如果倒数第二个糖是岩藻糖，则需要更长时间的孵化。

特异性：从复杂碳水化合物和糖蛋白中切割α-(1-3)和α-(1-6)连接的非还原末端半乳糖。

比活性：一个单位的α-(1-3,6)-半乳糖苷酶定义为在25°C pH 6.5条件下，1分钟内产生1 μmole的对硝基苯酚（pNP）所需的酶量，来自对硝基苯基-α-D-半乳糖苷。

储存：将酶储存在4?C。

纯度：每批α-半乳糖苷酶都经过以下方式测试污染性蛋白酶；10 μg的变性牛血清白蛋白与2 μL的酶一起孵化24小时。经处理的BSA的SDS-PAGE分析显示没有降解迹象。

生产宿主菌株经过广泛测试，不产生任何可检测的糖苷酶。

稳定性：在适当储存的条件下至少稳定12个月。暴露在环境温度下几天不会降低活性。

QA-Bio-α-半乳糖苷酶文献参考：

1. Kobata, A. Use of endo- and exoglycosidases for structural studies of glycoconjugates. Anal Biochem 100: 1- 14 (1979).

2. Prime, S. J. Dearnley, A.M. Venton, R.B. Parekh and C.J. Edge. Oligosaccharide sequencing based on exo- and endoglycosidase digestion and liquid chromatographic analysis of the products. J Chromatogr A 720: 263-274 (1996)

3. Dwek, R.A. , C.J. Edge, D.J. Harvey, M.R. Wormald and R.B. Parekh. Analysis of glycoprotein-associated oligosaccharides. Ann Rev Biochem 62: 65-100.

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