一、产品描述
由艾美捷代理Cytoskeleton推出的人源重组MKLP2马达结构域蛋白(货号:CS-MP05)是一种有丝分裂驱动蛋白马达蛋白,对染色体正确分离和胞质分裂至关重要,其通过与微管相互作用驱动纺锤体组织来发挥功能。KIF20A 在细胞周期进程中起关键作用,其失调已被证实与癌症增殖及不良预后相关。
本品为野生型人源 KIF20A(MKLP2)马达域,采用细菌表达系统生产。
蛋白标签:N 端 6× His 标签
分子量:54 kDa
马达域氨基酸范围:1–519
Uniprot ID:O95235
剂型:冻干粉
复溶后组成:80 mM PIPES pH 6.8、100 mM NaCl、2 mM MgCl2、0.2% Triton X-100、6%(w/v)蔗糖及 1%(w/v)葡聚糖
二、应用方向
微管(MT)激活型驱动蛋白 ATPase 实验的底物
KIF20A 抑制剂筛选
驱动蛋白候选药物的反筛选
三、纯度
蛋白纯度通过 4–20% 聚丙烯酰胺凝胶上 Coomassie 蓝染色蛋白的扫描密度测定法评估,纯度大于 70%。主要污染物位于约 51 kD 和 70 kD 处,但经证实这些污染物不影响 MKLP2 马达域的微管激活型 ATPase 活性。因此,每管总蛋白量约为标签标示量的 1.3 倍。
四、生物活性检测
CS-MP05 的生物活性通过微管激活型 ATPase 实验测定。在数据表所述条件下,KIF20A 表现出微管刺激的 ATPase 活性,Vmax ≥ 1330 nmol ATP/分钟/mg KIF20A。
五、储存与复溶
冻干蛋白在 4°C、干燥剂存在(湿度 <10%)条件下可稳定保存至少 1 年;亦可储存于 -70°C,稳定保存至少 1 年。
复溶时,使用冰浴预冷的 Milli-Q 水将蛋白复溶至 5 mg/ml。复溶后可按实验用量分装,并液氮速冻保存。复溶后于 -70°C 储存时,蛋白可稳定保存至少 4 个月。
注意事项: 驱动蛋白对反复冻融耐受性差;于 -70°C 储存时,蛋白浓度不应低于 5 mg/ml。已稀释至 5 mg/ml 以下的驱动蛋白不应再次冻存,否则将丧失活性。
六、材料与生产
人源 MKLP2 保守马达域在原核系统中表达,重组蛋白 N 端带有 His 标签,总分子量 54 kDa。该蛋白已在微管激活型 ATPase 活性测试中被证实具有生物活性,以冻干粉形式提供。
文献参考
1. Hackney, D and Jiang, W. (2001) Methods in MolecularBiology (Humana Press) 164:65-71
2. Kuriyama et al. 1994. J. Cell Science 107:3485-3499.
3. Nislow et al. 1992. Nature 359:543-547.

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