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BPS Bioscience TNFR2 HEK293 细胞系:筛选和表征TNFR2抗体

发布者:艾美捷科技    发布时间:2024-12-24     
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描述

重组HEK293细胞系,稳定表达人类TNFR2基因(TNFRSF1B或CD120b,NM_001066.3),受CMV启动子控制。


背景

肿瘤坏死因子受体2(TNFR2,也称为TNFRSF1B或CD120b)是TNF蛋白超家族的一种跨膜受体,能够结合多效性的促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。TNFR2可以在几种T细胞亚群中找到,如调节性CD8+ T细胞(Tregs)和CD4+肿瘤浸润性T细胞、髓系细胞和某些癌症类型,它涉及自身免疫疾病、移植物抗宿主病和癌症。TNFR2已成为癌症免疫疗法的一个有吸引力的靶点,其作为癌基因和免疫调节因子的不同功能正在被探索。TNFR2还表现出神经保护特性,并促进组织再生,使其成为治疗阿尔茨海默病的有前景的潜在治疗靶点。


作为BPS Bioscience在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品TNFR2 HEK293 细胞系产品仅用于科研,不可用于临床诊断。

产品名称货号详情

TNFR2 HEK293 细胞系

BPS-78828查看


应用

? 筛选和表征TNFR2抗体。

? 在HEK293细胞中研究TNFR2信号传导。


细胞解冻

1. 在37°C水浴中摇晃冷冻细胞瓶大约60秒。一旦细胞解冻(可能比60秒稍快或稍慢),迅速将瓶中全部内容物转移到含有10毫升预温的解冻培养基1(不含普鲁霉素)的试管中。在37°C水浴中放置过久会导致细胞活性迅速丧失。

2. 立即以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基,并在5毫升预温的解冻培养基1(不含普鲁霉素)中重悬细胞。

3. 将重悬的细胞转移到T25或T75培养瓶中,并在37°C的5% CO2培养箱中培养。

4. 培养24小时后,检查细胞附着和活性。更换为新鲜的解冻培养基1(不含普鲁霉素),并在37°C的5% CO2培养箱中继续培养,直到细胞准备好传代。

5. 细胞应在完全融合前传代。对于第一次传代及后续传代,使用生长培养基1N(含普鲁霉素)。


细胞传代

1. 抽吸培养基,用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗细胞,并用0.05%胰蛋白酶/EDTA从培养容器中分离细胞。

2. 一旦细胞分离,加入生长培养基1N并转移到试管中。以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基,并在生长培养基1N(含普鲁霉素)中重悬细胞。按照推荐的次培养比例范围1:8至1:10,每周一次或两次接种到新的培养容器中。


细胞冷冻

1. 抽吸培养基,用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗细胞,并用0.05%胰蛋白酶/EDTA从培养容器中分离细胞。

2. 一旦细胞分离,加入生长培养基1N并计数细胞。

3. 以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基,并在4°C的冷冻培养基(BPS Bioscience #79796)中重悬细胞至约2 x 10^6细胞/毫升。

4. 将1毫升的细胞悬浮液分装到每个冷冻小瓶中。将小瓶放置在保温容器中缓慢冷却,并在-80°C下过夜保存。

5. 次日将小瓶转移到液氮中进行长期储存。


数据展示:

BPS-78828.png

图1:TNFR2 HEK293细胞系中TNFR2的表达。

TNFR2 HEK293细胞(绿色)或对照亲本HEK293细胞(蓝色)用PE偶联的抗TNFR2抗体(Biolegend #358404)染色,并通过流式细胞仪分析。Y轴是细胞数量百分比。X轴是PE的强度。


文献参考:

1. Chen X, et al. (2017). Science Signaling, 10(462): 2328

2. Chopra M, et al. (2016) Exogenous TNFR2 activation protects from acute GvHD via host T reg cell

expansion. Journal of Experimental Medicine 213: 1881-1900

3. Medler J, et al. (2022) Tumor Necrosis Factor Receptor 2 (TNFR2): An Emerging Target in Cancer Therapy.

Cancers 14(11): 2603

4. Vanamee ?. and Faustman D. (2017). TNFR2: A Novel Target for Cancer Immunotherapy. Trends in

Molecular Medicine, 23(11): 1037-1046


BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商,公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立,从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案,以推动新的药物发现。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 


作为BPS Bioscience在中国的区域代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BPS Bioscience以及客户订制化服务。


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