重组HEK293细胞稳定表达全长人类FcRL5(Fc受体样5,也称为CD307,参考序列NM_031281)。
背景
FcRL5是一种单次跨膜的类型1膜蛋白,包含8个免疫球蛋白样C2型结构域。FcRL5可能参与B细胞发育和淋巴瘤发生。此外,它在被诊断为多发性骨髓瘤患者的恶性浆细胞中富集,是抗体药物偶联物(ADC)和抗FcRL5 CAR T细胞的有吸引力的靶标。
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产品名称 | 货号 | 详情 |
FcRL5 HEK293 细胞系 | BPS-78374 | 查看 |
应用
用作抗FcRL5 CAR T细胞、抗FcRL5 ADC和双特异性抗体的靶细胞。
细胞培养协议
细胞解冻
1. 在37°C水浴中摇晃装有冷冻细胞的小瓶大约60秒。细胞一旦解冻(可能比60秒稍快或稍慢),迅速将小瓶的全部内容转移到含有10毫升预温的解冻培养基1(不含普鲁霉素)的试管中。如果将细胞在37°C水浴中放置过久,将导致活性迅速丧失。
2. 立即以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基并用5毫升预温的解冻培养基1(不含普鲁霉素)重悬细胞。
3. 将重悬的细胞转移到T25或T75培养瓶中,并在37°C和5% CO2培养箱中培养。
4. 培养24小时后,检查细胞附着和活性。更换培养基为新鲜的解冻培养基1(不含普鲁霉素),并在37°C和5% CO2培养箱中继续培养,直到细胞准备好传代。
5. 细胞应在完全融合前进行传代。在第一次传代和后续传代中,使用生长培养基1T(含普鲁霉素)。
细胞传代
1. 抽吸培养基,用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗细胞,并用0.05%胰酶/EDTA从培养容器中分离细胞。
2. 一旦细胞分离,加入生长培养基1T并转移到试管中。以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基并用含普鲁霉素的生长培养基1T重悬细胞。每三天按照1:10的期望传代比例将细胞种植到新的培养容器中。
细胞冷冻
1. 抽吸培养基,用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗细胞,并用0.05%胰酶/EDTA从培养容器中分离细胞。
2. 一旦细胞分离,加入生长培养基1T并计数细胞。
3. 以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基并在4°C冷冻培养基(BPS Bioscience #79796,或10% DMSO + 90% FBS)中重悬细胞,细胞浓度约为2 x 10^6个细胞/毫升。
4. 将1毫升的细胞悬浮液分装到冷冻小瓶中。将小瓶放入保温容器中缓慢冷却,并在-80°C下过夜保存。
5. 次日将小瓶转移到液氮中保存。
注意:建议在早期传代时扩增细胞并至少冷冻10个小瓶以备将来使用。
图1. FcRL5 HEK293细胞中FcRL5表达的分析。35,000个FcRL5 HEK293细胞和HEK293亲本细胞用PE偶联的抗人FcRL5抗体(BioLegend,#340304)染色,并通过流式细胞仪分析。HEK293亲本细胞以绿色显示,FcRL5 HEK293细胞以蓝色显示。
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