BPS Bioscience TetR HEK293 细胞系：用于研究四环素调控机制的细胞模型

TetR HEK293细胞系是一种表达四环素抗性元件（TetR）阻遏蛋白的HEK293细胞系，构建了一个基于四环素或多西环素在细胞培养基中存在与否的可诱导系统。这些细胞可以转染感兴趣的靶基因，该基因受强启动子和四环素操纵子的控制。在没有四环素或多西环素的情况下，TetR结合到操纵子上并抑制转录。当接触到四环素或多西环素时，TetR对四环素抗性元件的亲和力降低，从而发生感兴趣的靶基因的表达。该细胞系已通过多西环素刺激进行了验证。

背景

TetR，或四环素阻遏蛋白在四环素（Tc）抗生素抗性发展中发挥作用。Tc是一类通过干扰蛋白质合成来杀死细菌的抗生素。对Tc的抗性是通过表达Tc抗性基因发生的，这些基因由TetR调节。除了研究抗生素抗性的机制外，TetR的使用已被用作调节启动子表达的模式，从而创建可诱导的细胞模型。这些可诱导的细胞模型对于理解细胞途径至关重要。

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品TetR HEK293 细胞系。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

应用

瞬时四环素诱导的感兴趣靶蛋白的表达。

细胞解冻

1. 在37°C水浴中摇晃冷冻细胞瓶大约60秒。一旦细胞解冻（可能比60秒稍快或稍慢），迅速将瓶中全部内容物转移到含有10毫升预温的解冻培养基1的试管中。

注意：在37°C水浴中放置过久会导致细胞活性迅速丧失。

2. 立即以300 x g的速度离心细胞5分钟，去除培养基，并在5毫升预温的解冻培养基1中重悬细胞。

3. 将重悬的细胞转移到T25培养瓶中，并在37°C的5% CO2培养箱中培养。

4. 培养24小时后，检查细胞附着和活性。更换为新鲜的解冻培养基1，并在37°C的5% CO2培养箱中继续培养，直到细胞准备好传代。

5. 细胞应在完全融合前传代。在第一次传代及后续传代中，使用生长培养基1H。

细胞传代

1. 抽吸培养基，用无Ca2+/Mg2+的磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗细胞，并用0.05%胰蛋白酶/EDTA从培养容器中分离细胞。

2. 一旦细胞分离，加入生长培养基1H并转移到试管中。

3. 以300 x g的速度离心细胞5分钟，去除培养基，并在生长培养基1H中重悬细胞。

4. 按照推荐的次培养比例1:8至1:20，每周一次或两次接种到新的培养容器中。

注意：解冻后和细胞密度低时，细胞可能生长速度较慢。在这些情况下，建议以1:4的比例分离细胞。经过几次传代后，细胞生长速度增加，可以使用更高的比例进行分离。

细胞冷冻

1. 抽吸培养基，用无Ca2+/Mg2+的PBS冲洗细胞，并用0.05%胰蛋白酶/EDTA从培养容器中分离细胞。

2. 一旦细胞分离，加入生长培养基1H并计数细胞。

3. 以300 x g的速度离心细胞5分钟，去除培养基，并在4°C的细胞冷冻培养基（BPS Bioscience #79796）中重悬细胞至约2 x 10^6细胞/毫升。

4. 将1毫升的细胞悬浮液分装到每个冷冻小瓶中。将小瓶放置在保温容器中缓慢冷却，并在-80°C下过夜保存。

5. 次日将小瓶转移到液氮中进行长期储存。

相关产品：

TRPM-2 HEK293 Cell Line 90331 2 vials

CSL Reporter HEK293 Cell Line 79754 2 vials

RFP/GFP Safe Harbor HEK293 Cell Line 78581 2 vials

Cas9/GFP Safe Harbor HEK293 Cell Line 78582 2 vials

GAL4 Luciferase Reporter HEK293 Cell Line 60656 2 vials

GR-GAL4 Luciferase Reporter HEK293 Cell Line 60655 2 vials

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

作为BPS Bioscience在中国的区域代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BPS Bioscience以及客户订制化服务。