H3|组蛋白H3(兔抗体)(核标记)在细胞核功能与染色质动态中的应用

组蛋白3（H3）位于细胞核中，并入染色质。与H2A、H2B和H4一起存在于核小体中。

艾美捷H3|组蛋白H3(兔抗体)(核标记)：

货号：AS10-710

免疫原：与KLH偶联的合成肽，源自已知的H3序列，包括拟南芥H3.3（P59169，基因编号At4g40030、At4g40040、At5g10980）、H3.2（P59226，基因编号At1g09200、At3g27360、At5g10390、At5g10400、At5g65360）和H3-like 2（Q9FXI7，基因编号At1g19890）

宿主：兔

克隆性：多克隆

纯度：血清

形式：冻干粉

数量：50 ?l

复溶方法：复溶时加入50 ?l无菌水

储存条件：冻干粉/复溶后于-20°C保存；复溶后请分装，避免反复冻融。打开管子前请短暂离心，以避免因材料粘附在盖子或管壁上而导致的损失。

额外信息：细胞核（核质）标记物，适用于莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）的染色质免疫沉淀-定量PCR（ChIP-qPCR）的加载对照抗体。

推荐稀释度：1:100-1:500（免疫细胞化学），ChIP-qPCR每500 ?l溶液中使用2 ?l抗体，1:500（免疫荧光），1:5000（Western Blot）

预期/表观分子量：15 | 17 kDa

已确认的反应性：拟南芥、灰霉病菌、甘蓝、辣椒、茜草素、衣藻嗜酸菌、莱茵衣藻、苏育黄瓜、柱状西葫芦、大麦

庸俗、人类、烟草属、蝴蝶兰、三角褐指藻、斑毛藻，盐角草属植物、番茄、茄、马铃薯、蚕豆、玉米

预测的反应性：双茎苞叶螟、甘蓝型油菜、胡枝子、苦荞麦。，甘氨酸max，微绿球藻、烟草、苹果、苜蓿、水稻、Ostreococcus sp。松、豌豆、紫球藻、甘蔗、高粱、小麦、葡萄葡萄，Volvox sp。

未反应的生物：目前尚未发现与预测反应性不符的已确认例外情况

额外信息：在免疫细胞化学（ICC）中，已观察到中期核以及有丝分裂染色体的着丝粒区域（组蛋白H3的Ser10位点发生磷酸化）有特异性荧光。

应用实例：

图：从拟南芥中提取的1.2 ?g染色质富集组分（1）和4周龄拟南芥叶片中的3.75 ?g总蛋白（2），在12%的SDS-PAGE上分离后，转印至Immobilon-P（Millipore，半干法）PVDF膜，转印时间为50分钟。转印后，膜立即用MTBS-T（5%脱脂奶粉）在室温下封闭30分钟，期间不断搅拌。膜在1:5000稀释的一抗中孵育1小时，室温下搅拌。弃去一抗溶液后，膜短暂冲洗两次，然后在室温下用TBS-T洗涤3次，每次3分钟，期间不断搅拌。膜在二抗（抗IgG辣根过氧化物酶偶联抗体，Agrisera，AS09 602，稀释至1:20,000）中孵育30分钟，室温下搅拌。膜按上述方法洗涤后，用ECL检测试剂显色5分钟，按照制造商的说明进行操作。曝光时间为30秒。染色质富集组分（1）中出现的双条带在肽中和实验中被用于诱导H3抗体的肽所竞争。染色质分离按照Zilberman等（2008）的描述进行，略有修改。

感谢Weronika Sura和Adam Mickiewicz大学生物技术系的Piotr A. Ziolkowski博士，波兰波兹南。

H3|组蛋白H3(兔抗体)(核标记)文献参考：
Martín-Merchán et al. (2024). Arabidopsis AGO1 N-terminal extension acts as an essential hub for PRMT5 interaction and post-translational modifications. Nucleic Acids Res . 2024 May 20:gkae387.doi: 10.1093/nar/gkae387.

Mosesso et al. (2024). Arabidopsis CaLB1 undergoes phase separation with the ESCRT protein ALIX and modulates autophagosome maturation. Nat Commun. 2024 Jun 19;15(1):5188. doi: 10.1038/s41467-024-49485-6.

Nguyen et al.(2024). The processed C-terminus of AvrRps4 effector suppresses plant immunity via targeting multiple WRKYs.J Integr Plant Biol. 2024 Jun 13.doi: 10.1111/jipb.13710.