在植物光信号转导研究中,HY5(Long Hypocotyl 5)作为光形态建成的核心调控因子,一直是植物发育生物学领域的重点研究对象。针对这一关键转录因子的检测需求,我们推出高品质的抗HY5抗体(产品编号:AS12 1867),为科研工作者提供特异、可靠的蛋白检测方案。
一、产品基本信息
由艾美捷代理Agrisera推出的抗HY5抗体(货号:AS12 1867),采用免疫原亲和纯化技术制备,以冻干粉形式供应,每管含量50 ?g。免疫原为一段与KLH蛋白偶联的合成多肽,其序列来源于拟南芥HY5蛋白(UniProt: O24646, TAIR: AT5G11260),且该抗原肽段在HY5蛋白序列中不具有保守性,这一设计显著提升了抗体的特异性识别能力。
二、应用与操作要点
该抗体主要适用于Western blot检测,推荐稀释比例为1:500至1:1000。HY5蛋白的预期分子量为18.5 kDa,在结果判读时应以此作为目标条带位置的参考标准。
关键实验注意事项:
1. 蛋白提取条件:对于内源蛋白的检测,必须使用含6-8 M尿素的提取缓冲液和上样缓冲液,或采用TCA/丙酮沉淀法进行蛋白提取(亦可参照Mechin等2007年描述的方法)。常规的RIPA等非变性裂解液可能无法有效释放核定位的HY5蛋白,导致检测失败。
2. 样品采集要求:HY5蛋白在光照条件下易发生降解,因此样品收获全过程需在暗绿色安全光下进行操作,避免白光照射导致目的蛋白快速降解,确保检测结果的真实性。
3. 应用验证:该抗体已成功检测本氏烟草中重组表达的HY5蛋白,证实其识别异源表达蛋白的有效性。
三、物种反应性
已确认反应种属:拟南芥。
预测反应种属:大白菜(基于序列同源性分析)。
无反应种属:柑橘、大麦、地钱、水稻、豌豆、杨属、番茄、普通小麦、玉米。对于未列出的物种,可联系技术支持进行预测评估。
四、储存与操作规范
为保证产品长期稳定性和活性,请遵循以下操作:
1. 溶解:加入50 ?l无菌水进行复溶。
2. 储存:冻干粉及复溶后均建议储存于-20°C。
3. 分装:复溶后务必分装保存,避免反复冻融导致抗体活性下降。
4. 使用前:开盖前请短暂离心,确保冻干粉末或液体全部沉于管底,避免因附着在管壁或管盖造成损失。
五、背景与研究意义
HY5(Long Hypocotyl 5)属于bZIP转录因子家族(亦称AtbZIP56),是光形态建成过程中的核心正调控因子。在光照条件下,HY5通过激活大量光响应基因的表达,促进幼苗去黄化、子叶展开、叶绿素合成及根系发育等光形态建成过程。HY5还参与蓝光特异性信号通路,其功能缺失突变体表现为下胚轴显著伸长的暗形态建成表型。
在组织表达谱方面,HY5广泛分布于根、下胚轴、子叶、叶片、茎和花器官等多种组织中,其亚细胞定位于细胞核内。HY5蛋白在体内以异源二聚体的形式发挥作用,与其他bZIP家族成员协同调控下游靶基因的表达网络。
六、产品优势总结
高特异性:选用非保守区域抗原肽段,有效避免与其他bZIP家族成员的交叉反应。
严格验证:在拟南芥内源体系和本氏烟草异源表达体系中均得到验证。
明确指导:提供针对HY5蛋白特性的专用提取缓冲体系和样品采集方案,降低实验试错成本。
综上,抗HY5抗体(AS12 1867)凭借其严谨的设计、明确的适用范围和针对性的操作规范,是光信号转导和光形态建成研究中一个功能可靠、特异性强的理想检测工具。
文献参考:
Singhal et al. (2026). CUL3LRB E3 ubiquitin ligases control thermosensory growth in Arabidopsis by differentially regulating HY5 and PIF4 protein stability. Sci Adv. 2026 Mar 6;12(10):eaec7817. doi: 10.1126/sciadv.aec7817.
Malakar et al. (2025). BBX24/BBX25 antagonizes the function of thermosensor ELF3 to promote PIF4-mediated thermomorphogenesis in Arabidopsis. Plant Commun. 2025 May 28:101391.doi: 10.1016/j.xplc.2025.101391.
Yao et. al. 2024).Cooperative transcriptional regulation by ATAF1 and HY5 promotes light-induced cotyledon opening in Arabidopsis thaliana. Sci Signal. 2024 Jan 2;17(817):eadf7318.

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