兔骨骼肌生物素标记肌动蛋白，从体外生物膜建模到ABP功能研究方案

产品概述

由艾美捷代理Cytoskeleton推出的兔骨骼肌生物素标记肌动蛋白（货号AB07）为生物素标记的兔骨骼肌肌动蛋白。该蛋白以未修饰的兔骨骼肌肌动蛋白（货号AKL99）为原料，采用活化生物素酯对随机表面赖氨酸残基进行共价标记。标记化学计量比约为每个肌动蛋白单体连接1个生物素分子。生物素化肌动蛋白分子量约为43 kDa，以白色冻干粉形式提供。

应用场景

本品适用于以下研究方向：肌动蛋白组织及其对肌动蛋白结合蛋白（ABP）功能的影响、体外生物膜建模、骨骼肌介导力/应力的分子机制研究，以及肌球蛋白运动实验、光镊与光阱等单分子操控实验。生物素标记使肌动蛋白可通过链霉亲和素或亲和素实现固定化、捕获或检测，为上述应用提供灵活的偶联手段。

纯度

产品纯度通过12%聚丙烯酰胺凝胶考马斯蓝染色后的扫描光密度法评估，确定纯度大于99%。

生物活性

生物素化肌动蛋白的生物活性通过其在体外高效聚合成丝的能力进行测定，并采用离心沉降实验将聚合态与未聚合组分分离。严格的质量控制确保在该实验中>90%的生物素化肌动蛋白可发生聚合，其聚合能力与未修饰的肌动蛋白AKL99相当。这一活性指标可直接用于需要肌动蛋白聚合的实验体系。

储存与复溶

复溶前先短暂离心，使产品聚集于管底。冻干蛋白在4°C、干燥条件（湿度<10%）下可稳定保存6个月。复溶时，使用2 ul纳米纯水将蛋白复溶至10 mg/ml，此时缓冲液组成为5 mM Tris-HCl pH 8.0、0.2 mM CaCl2、0.2 mM ATP、5%（w/v）蔗糖及1%（w/v）葡聚糖。浓缩蛋白可用液氮速冻并储存于-70°C，可稳定保存6个月。工作浓度稀释应使用通用肌动蛋白缓冲液（货号BSA01）并补充0.2 mM ATP（货号BSA04）及0.5 mM DTT。

关键注意事项

生物素化肌肉肌动蛋白属于不稳定蛋白，操作时应格外小心。应避免反复冻融循环，建议根据实验用量一次性分装冻存，以确保蛋白活性与实验结果的重复性。

应用文献

1- F-actin architecture determines consraints on myosin thickfilament motion. 2022. Muresan C. et al. Nature Commun. 13,7008

2- α-catenin swithches between a slip and an asymmetric catchbond with F-actin to cooperatively regulate cell junction fluidity.Naure Commun. 13, 1146

3- Design and construction of a multi-tiered minimal actin cortexfor structural support in lipid bilayer applications. 2024. SmithA.J. et al. Appl. Bio. Mater. 7: 1936-1946

4- Encapsulated actomyosin patterns drive cell-like membraneshape changes. 2022. Bashirzadeh Y. et al. iScience. 25 (5),104236