iFluor 555-麦胚凝集素(WGA)结合物：精准的细胞标记和成像解决方案

小麦胚芽凝集素（WGA）是一种凝集素，能够与N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸结合。它是研究最深入且在生物学应用中最有用的凝集素之一。由于WGA能够与糖缀合物结合，其衍生物和结合物被广泛用于标记细胞膜和纤维化瘢痕组织，以进行荧光成像和分析。WGA的糖结合特异性针对的是β-1,4-GlcNAc连接残基序列，即壳聚糖。每个单体包含两个相同且不相互作用的结合位点，这些位点与3或4个β-1,4-GlcNAc单元互补。在所检测的单糖中，只有GlcNAc能够与WGA结合。ManNAc不结合，而GalNAc结合力很弱。它展现出iFluor? 555染料的明亮红色荧光。iFluor?555 WGA结合物与唾液酸和N-乙酰葡糖胺残基的结合方式与AF555 WGA结合物相同。

艾美捷iFluor 555-麦胚凝集素(WGA)结合物：

货号：AAT-25539

单位大小：1 毫克

溶剂：水

校正因子（260 纳米）：0.23

校正因子（280 纳米）：0.14

消光系数（cm -1 M -1）：100000

激发（纳米）：557

发射（纳米）：570

量子产率：0.64

H-短语：H303, H313, H333

危险符号：XN

预期用途：仅限研究使用（RUO）

R-短语：R20, R21, R22

储存：冷冻（< -15 °C）；尽量减少光照暴露

激发：Cy3, TRITC 滤光片组

发射：Cy3, TRITC 滤光片组

推荐板：黑色壁，透明底

储备溶液的制备：

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性等分，并在制备后储存在-20°C下。避免反复冻融循环

iFluor?555小麦胚芽凝集素（WGA）结合物储备溶液（200X）

将500?L的ddH2O加入粉末中，制成2mg/mL的储备溶液。

注：复溶的结合物溶液可以在2-8°C下短期储存，也可以在-20°C下长期储存。

iFluor 555-小麦胚芽凝集素（WGA）结合物库存溶液（200X）

向粉末中加入500 ?L的去离子水，制成2 mg/mL的库存溶液。

注意：重组后的结合物溶液可以储存在2-8 °C进行短期储存，或在 -20 °C进行长期储存。

工作溶液的准备：

iFluor? 555-小麦胚芽凝集素（WGA）结合物工作溶液（1X）

向1 mL HHBS缓冲液中加入5 ?L的200X WGA结合物溶液。

注意：不同细胞系的最佳染色浓度可能不同。推荐的起始浓度为活细胞5-10 ?g/mL。

样品实验协议：

在打开前将瓶加热至室温并短暂离心。染色协议因应用而异。应通过实验确定结合物的适当稀释度。

活细胞染色：

用HHBS缓冲液洗涤细胞两次。

加入100 ?L iFluor? 555-WGA工作溶液。

在37 °C下用WGA工作溶液孵育细胞10-30分钟。

用HHBS缓冲液洗涤细胞两次。

使用Cy3/TRITC滤光片组在荧光显微镜下成像细胞。

固定细胞染色：

WGA结合物也可用于染色固定细胞。

用4%的甲醛在PBS中固定细胞。

注意：对于固定细胞膜染色，建议跳过通透化步骤进行染色。固定后的通透化步骤可以帮助染色细胞内室，如高尔基体和内质网（ER）结构。

加入100 ?L iFluor? 555-WGA工作溶液。

在室温下用WGA工作溶液孵育细胞10-30分钟。

用HHBS缓冲液洗涤细胞两次。

使用Cy3/TRITC滤光片组在荧光显微镜下成像细胞。

图：活HeLa细胞用5?g/mL的iFluor?555小麦胚凝集素（WGA）偶联物染色30分钟，然后用Hoechst 33342（AAT Cat#17535）染色。使用Cy3/TRITC和DAPI滤光片组通过荧光显微镜获取图像。

iFluor 555-麦胚凝集素(WGA)结合物文献参考：

Wheat germ agglutinin is involved in the protective action of 24-epibrassinolide on the roots of wheat seedlings under drought conditions.

Authors: Avalbaev, Azamat and Bezrukova, Marina and Allagulova, Chulpan and Lubyanova, Alsu and Kudoyarova, Guzel and Fedorova, Kristina and Maslennikova, Dilara and Yuldashev, Ruslan and Shakirova, Farida

Journal: Plant physiology and biochemistry : PPB (2020): 420-427

Membrane-associated gamma-glutamyl transferase and alkaline phosphatase in the context of concanavalin A- and wheat germ agglutinin-reactive glycans mark seminal prostasome populations from normozoospermic and oligozoospermic men.

Authors: Jankovi?, Tamara and Go?, Sanja and Miti?, Ninoslav and Danilovi? Lukovi?, Jelena and Jankovi?, Miroslava

Journal: Upsala journal of medical sciences (2020): 10-18

Succinylated Wheat Germ Agglutinin Colocalizes with the Toxoplasma gondii Cyst Wall Glycoprotein CST1.

Authors: Guevara, Rebekah B and Fox, Barbara A and Bzik, David J

Journal: mSphere (2020)

Wheat germ agglutinin is a biomarker of whole grain content in wheat flour and pasta.

Authors: Killilea, David W and McQueen, Rebecca and Abegania, Judi R

Journal: Journal of food science (2020): 808-815

Wheat germ agglutinin liposomes with surface grafted cyclodextrins as bioadhesive dual-drug delivery nanocarriers to treat oral cells.

Authors: Wijetunge, Sashini S and Wen, Jianchuan and Yeh, Chih-Ko and Sun, Yuyu

Journal: Colloids and surfaces. B, Biointerfaces (2020): 110572