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山羊抗人IgG Fc片段抗体IgG组分,灵活适配DD/IEP/IFE多种沉淀检测平台,成本可控

发布者:艾美捷科技    发布时间:2026-05-22     
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一、产品概述

本产品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊抗人IgGFc片段多克隆抗体(货号:A80-104P),采用全IgG形式提供,未偶联标记。该抗体经固相吸附处理和DEAE层析纯化获得IgG组分,特异性识别人类IgG分子的Fc区段,适用于免疫沉淀反应相关技术,如双向免疫扩散(DD)和免疫电泳(IEP)。产品原产于美国,储存条件为28°C,有效期长达2年。

 

二、靶点背景:人IgGFc片段

人免疫球蛋白G(IgG)是血清/血浆中含量最高的免疫球蛋白,在体液免疫应答中发挥核心作用。其分子结构由两条重链和两条轻链组成,分为抗原结合区(Fab段)和可结晶区(Fc段)。Fc段负责与免疫细胞表面的Fc受体结合,介导中和毒素、激活补体、调理吞噬、抗体依赖细胞介导的细胞毒性(ADCC)等效应功能。

本抗体特异性靶向IgG重链的Fc片段,不与Fab片段或轻链发生交叉反应,因此可区分完整IgG分子及其酶解片段,适用于免疫球蛋白结构分析和定性检测。

 

三、产品规格参数

项目 规格

靶点 人IgGFc片段

反应性 人(可能与其他物种IgG交叉反应)

宿主 山羊

克隆性 多克隆

形式 全IgG

同型 IgG

偶联物 未偶联

纯度 IgG组分(非亲和纯化,经DEAE层析)

抗原种属 人

浓度 效价:5 mg/ml(反相放射免疫扩散法测定)

缓冲液 磷酸盐缓冲液(PBS),含0.09%叠氮化钠

储存温度 28°C

有效期 收货后2年

 

四、生产与纯化工艺

4.1 抗血清制备

免疫原为人IgGFc片段,经免疫山羊后获得抗血清。为确保类特异性,抗血清进行了固相吸附处理,去除与其它免疫球蛋白或血清蛋白交叉反应的抗体。

4.2 IgG组分纯化

采用DEAE(二乙氨乙基)离子交换层析对抗血清进行分级分离,收集IgG组分。该方法获得的是总IgG,而非抗原特异性亲和纯化的抗体,因此保留了多克隆抗体的广泛识别能力,同时去除了大部分非IgG血清蛋白。

4.3 质量控制

总蛋白测定:采用比尔定律,1 mg/ml IgG在280 nm吸光度为1.4。

效价测定:通过反向放射免疫扩散(reverse RID)测定,效价为5 mg/ml。

特异性验证:经免疫电泳(IEP)检测,该抗体仅与IgGFc反应,未检测到针对其他免疫球蛋白、轻链或非免疫球蛋白血清蛋白的抗体。需注意:该抗体可能与其他物种的IgG发生交叉反应。

 

五、推荐应用与实验方法

本产品主要设计用于沉淀反应类型的免疫检测技术,包括免疫电泳(IEP)、双向免疫扩散(Ouchterlony法,DD)以及免疫固定电泳(IFE)。注意:并非所有列出的应用均经过生产实验室的正式验证,最佳工作稀释度需由研究者通过实验确定。

5.1 双向免疫扩散(DD)

推荐工作浓度:原液(Neat)

实验要点:

在琼脂糖凝胶板上打孔,分别加入抗原(人血清或纯化IgG)和抗体(本产品原液)

于湿盒中室温或37°C扩散2448小时

观察沉淀线形成。由于抗体为多克隆且针对Fc片段,若抗原为完整IgG,应出现单一沉淀线;若存在IgG降解片段(如Fab或Fc),可观察到多条沉淀线或沉淀线融合现象

5.2 免疫电泳(IEP)

推荐工作浓度:原液(Neat)

5.3 其他应用提示

虽然产品说明主要列出DD和IEP,但此类抗Fc特异性抗体还可用于:

免疫固定电泳(IFE):辅助鉴定血清或尿液中单克隆免疫球蛋白的重链亚型

可作为未偶联中间体,进一步标记酶(HRP、AP)、荧光素(FITC、Cy系列)或生物素,用于ELISA、WB等检测系统(但需自行优化偶联条件)

 

六、储存与稳定性

储存条件:28°C,严禁冷冻。冷冻会导致蛋白质变性、聚集和活性丧失。

缓冲液组成:磷酸盐缓冲液(PBS,pH约7.4),含0.09%叠氮化钠作为防腐剂。

有效期:收货后2年内稳定。建议分装后储存于28°C,避免反复取用导致污染。

运输与接收:收到产品后请立即检查是否浑浊或沉淀,如无异常,按指定条件储存。

 

七、使用注意事项

1.叠氮化钠警示:缓冲液含叠氮化钠,对细胞具有毒性。若计划用于细胞培养上清检测或体内实验,需通过透析、脱盐柱或超滤去除。叠氮化钠也会抑制辣根过氧化物酶(HRP)活性,若后续需进行HRP标记,请务必去除。

2.交叉反应性:本抗体可能与其他物种(如小鼠、兔、牛等)的IgG发生交叉反应,尤其当这些物种IgG的Fc区结构与人源相似时。在涉及多物种样本的实验中,建议设置阴性对照。

3.效价验证:不同实验室的凝胶浓度、离子强度、温度等条件可能影响沉淀线清晰度。初次使用时,建议对原液进行梯度稀释(如1:1、1:2、1:4)进行预实验,以获得最佳沉淀反应强度。

4.非亲和纯化特性:本产品为IgG组分,而非抗原特异性亲和纯化抗体。这意味着其中包含针对人IgGFc的抗体,也包含少量非特异性山羊IgG。对于需要极高纯度的标记应用,建议进一步亲和纯化或选择亲和纯化级产品。

5.不适用于非沉淀方法:该抗体未经标记,也未验证用于Western Blot、ELISA或免疫组织化学等非沉淀技术。如需用于这些技术,用户需自行进行标记和条件优化。

 

八、相关产品推荐

产品类型 建议用途

人IgG标准品 DD和IEP实验中的阳性对照

抗人IgG(全分子)抗体 与抗Fc抗体联合使用,区分Fab和Fc片段

HRP/荧光标记抗山羊IgG 将本产品作为一抗时用于信号放大

叠氮化物去除柱 如需去除叠氮化钠进行酶标记或细胞实验

 

*本技术资料基于产品说明书编制,具体实验条件请研究者结合实际样本和实验室环境进行优化。


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