一、产品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的兔抗CEP152抗体亲和纯化抗体,货号:A302-480A是一款以兔为宿主来源、针对人CEP152(中心体蛋白152 kDa)的多克隆抗体。该抗体采用抗原亲和纯化工艺制备,以完整IgG形式提供,浓度高达1000 ?g/ml(1 mg/ml),未偶联任何标记物,主要适用于免疫沉淀应用。其超高浓度设计特别适合从细胞裂解物中高效富集CEP152蛋白及其相互作用复合物,是中心粒复制及中心体生物学研究的专用工具。
二、靶点信息:CEP152(中心体蛋白152 kDa)
CEP152(Centrosomal protein of 152 kDa)是果蝇asterless(Asl)蛋白的人类同源物,在中心粒复制过程中发挥关键调控作用。其主要功能包括:
中心粒复制:CEP152是中心粒双体形成和复制的必需因子,参与招募PLK4等关键激酶至中心粒复制起始位点
中心体结构维持:作为中心体支架蛋白,CEP152与其他中心体蛋白(如CEP192、CEP63)协同作用,确保中心体的结构完整性
遗传关联:CEP152基因突变与多种疾病相关,包括常染色体隐性原发性小头畸形4型(MCPH4)、Seckel综合征5型(SCKL5),提示其在神经发育和细胞分裂中的重要性
别称:asterless、Cep152、MCPH4、MCPH9、SCKL5
三、免疫原与特异性
本抗体识别的表位位于人CEP152蛋白的特定区域。规格书中简要标注的免疫原区间为“Between 900 and 950”,而详细生产程序中明确说明:所识别表位对应于第825至875位氨基酸残基之间(参考序列EAW77355.1,GeneID 22995)。两者可能存在描述差异,实际操作中以825–875作为实际表位参考更为准确。
抗体采用固相载体上固定的表位特异性肽段进行亲和纯化,确保对CEP152的高特异性识别,避免与其他中心体蛋白或大分子支架蛋白发生交叉反应。
四、产品规格与储存
参数 | 详情
靶点 | CEP152
反应性 | 人
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形态 | 全IgG
亚型 | IgG
偶联物 | 未偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原种属 | 人
浓度 | 1000 ?g/ml
缓冲液 | Tris-柠檬酸-磷酸缓冲液,pH 7–8,含0.09%叠氮钠
储存条件 | 2–8°C
有效期 | 自收货起1年
浓度测定:采用比尔定律测定免疫球蛋白浓度,其中1 mg/ml IgG在280 nm波长的吸光度为1.4。
五、应用与推荐条件
应用 | 推荐用量/稀释度 | 备注
免疫沉淀(IP) | 6 ?g/mg 裂解物 | 每毫克总蛋白使用6 ?g抗体,这是本抗体的核心验证应用
免疫印迹(IP产物检测) | 未提供直接稀释度 | 通过IP富集后,使用抗兔IgG轻链HRP二抗进行WB检测
重要说明:本抗体未直接验证用于细胞裂解物的常规WB检测(即直接上样WB)。其设计和使用场景为:先使用A302-480A进行免疫沉淀富集CEP152,随后对IP产物进行WB检测。如需检测总裂解液中CEP152的表达水平,建议使用其他经验证的WB抗体或自行验证本抗体在WB中的适用性。
六、IP产物WB检测操作要点
通用条件:
封闭液及抗体稀释液:5% Milk-TBST
一抗孵育:过夜(overnight)——此处一抗指用于检测IP产物的抗体(可以是本抗体或其他抗体)
免疫沉淀产物WB检测的特殊要求:
二抗推荐:抗兔IgG轻链HRP偶联抗体
封闭缓冲液添加:5%正常猪血清(货号S100-020),以降低非特异性背景
七、产品优势总结
1. 超高浓度(1000 ?g/ml):远超常规抗体,IP用量仅6 ?g/mg裂解物,性价比极高,适合大规模IP及多次重复实验。
2. 明确表位定位:靶向825–875aa区域,位于蛋白中部,避免与N末端或C末端其他中心体蛋白产生交叉反应。
3. 亲和纯化高特异性:抗原特异性亲和纯化确保低背景,适合内源性蛋白的免疫沉淀。
4. IP专用设计:专门针对免疫沉淀应用进行验证和优化,提供明确的6 ?g/mg用量,无需用户摸索。
5. IP-WB配套方案:提供优化的IP产物WB检测条件(轻链HRP二抗 + 5%正常猪血清),有效降低背景,提高检测灵敏度。
6. 稳定储存:2–8°C保存,无需冷冻,有效期一年,避免反复冻融。
A302-480A是一款针对CEP152蛋白中部区域(825–875aa)的亲和纯化兔多克隆抗体,浓度为1000 ?g/ml,专门用于免疫沉淀应用。其超高浓度、明确的IP用量(6 ?g/mg裂解物)及优化的IP产物WB检测条件(轻链HRP二抗 + 5%正常猪血清)使其成为中心粒复制、中心体生物学及小头畸形机制研究的核心工具。在使用时需注意:本抗体未验证直接WB,必须通过IP富集后检测;严格遵循裂解液选择、预澄清、洗涤及对照设置等优化步骤,可获得高特异性、低背景的IP结果。对于研究CEP152蛋白相互作用、翻译后修饰及复合物组装的实验体系,A302-480A提供了可靠、高效的解决方案。

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