一、产品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的兔抗CEP192抗体亲和纯化抗体(货号:A302-324A)是一款以兔为宿主来源、针对人CEP192(中心体蛋白192 kDa)的多克隆抗体。该抗体采用抗原亲和纯化工艺制备,以完整IgG形式提供,浓度高达1000 ?g/ml(1 mg/ml),未偶联任何标记物,适用于免疫沉淀及免疫印迹实验。其高浓度设计特别适合需要大量抗体的IP应用及低丰度蛋白检测。
二、靶点信息:CEP192(中心体蛋白192 kDa)
CEP192(Centrosomal protein of 192 kDa)是中心体结构和功能的关键调控蛋白,主要功能包括:
中心体成熟:CEP192是中心体成熟过程的必需因子,参与中心体从G1期向G2/M期的转变
纺锤体组装:在有丝分裂过程中,CEP192作为支架蛋白,募集微管成核相关因子(如γ微管蛋白环复合物),促进纺锤体微管的形成
微管成核:CEP192直接参与微管的从头成核,是中心体组织微管能力的核心元件
此外,CEP192也被称为PPP1R62(蛋白磷酸酶1调节亚基62),提示其可能参与PP1磷酸酶活性的调控。
别称:192 kDa centrosomal protein、Cep192、cep192/SPD2、PPP1R62
三、免疫原与特异性
本抗体识别的表位位于人CEP192蛋白的特定区域。根据产品详细说明,抗体所识别的表位对应于第1800至1850位氨基酸残基之间(参考序列NP_115518.2,GeneID 55125)。需要注意的是,规格书中简要标注的免疫原区间为“Between 2400 and 2450”,此处以详细生产程序中的1800–1850为准,两者可能存在表述差异,建议以1800–1850作为实际表位参考。
抗体采用固相载体上固定的表位特异性肽段进行亲和纯化,确保对CEP192的高特异性识别,避免与其他中心体蛋白或大分子支架蛋白发生交叉反应。
四、产品规格与储存
参数 | 详情
靶点 | CEP192
反应性 | 人
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形态 | 全IgG
亚型 | IgG
偶联物 | 未偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原种属 | 人
浓度 |1000 ?g/ml
缓冲液 | Tris柠檬酸磷酸缓冲液,pH 7–8,含0.09%叠氮钠
储存条件 | 2–8°C
有效期 | 自收货起1年
浓度测定:采用比尔定律测定免疫球蛋白浓度,其中1 mg/ml IgG在280 nm波长的吸光度为1.4。
缓冲液特点:Tris柠檬酸磷酸缓冲体系在pH 7–8范围内提供稳定的离子环境,有利于抗体长期保存。含0.09%叠氮钠作为防腐剂。
五、应用与推荐稀释度
应用 | 推荐用量/稀释度 | 备注
免疫沉淀 |6 ?g/mg 裂解物 | 每毫克总蛋白使用6 ?g抗体
免疫印迹 |1:1000 – 1:5000 | 推荐使用38% Tris醋酸凝胶
六、免疫印迹操作要点
通用条件:
封闭液及抗体稀释液:5% MilkTBST
一抗孵育:过夜(overnight)
细胞裂解液WB检测:
二抗推荐:山羊抗兔IgG重轻链抗体(A120101P)
免疫沉淀产物WB检测:
二抗推荐:抗兔IgG轻链HRP偶联抗体
封闭缓冲液添加:5%正常猪血清(货号S100020),以降低非特异性背景
凝胶选择:CEP192分子量约为192 kDa,必须使用低百分比凝胶以获得良好分离。38% Tris醋酸凝胶是推荐选择,可确保高分子量蛋白的有效分辨率和转移效率。
A302324A是一款针对CEP192蛋白C末端区域(1800–1850aa)的亲和纯化兔多克隆抗体,浓度为1000 ?g/ml,适用于IP和WB检测。其超高浓度、明确的IP用量(6 ?g/mg裂解物)及针对高分子量蛋白优化的WB条件(1:1000–1:5000稀释,38% Tris醋酸凝胶)使其成为中心体生物学、有丝分裂调控及微管成核研究的核心工具。在实验操作中,严格遵循5% MilkTBST封闭、一抗过夜孵育、IP产物使用轻链HRP二抗及添加5%正常猪血清等条件,可获得高特异性、低背景的检测结果。尤其注意使用推荐的凝胶系统处理192 kDa的目标蛋白,以确保实验成功。

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