兔抗WDR5抗体亲和纯化，助力MLL/SET1复合物组装研究

产品概述

兔抗WDR5抗体亲和纯化是一款由艾美捷Bethyl Laboratories推出的针对人、小鼠、大鼠源WDR5（WD重复结构域蛋白5）的高亲和力兔多克隆抗体（货号：A302-430A）。该抗体经抗原亲和层析纯化，以完整IgG形式提供，浓度为200 ?g/ml，适用于免疫组织化学（IHC）和免疫印迹（WB）实验，是研究组蛋白甲基转移酶复合物组装的理想工具。

技术参数详解

基本特性

靶点蛋白：WDR5（WD重复结构域蛋白5）

反应种属：大鼠、小鼠、人

宿主来源：兔

克隆类型：多克隆

抗体形式：全分子IgG

亚型：IgG

标记：非偶联

免疫原信息

该抗体识别的表位位于人WDR5蛋白第50–100位氨基酸残基区域，具体对应NP_060058.1（GeneID 11091）编号系统中的第75–125位区间（免疫原为固相载体上固定化的WDR5特异性表位，位于75至125位残基之间）。该区域避开了WD重复的高度保守结构，有助于提高抗体的特异性识别能力。

纯化与浓度

纯化方式：抗原亲和纯化

浓度测定：采用比尔定律，1 mg/ml IgG在280 nm波长下的吸光度为1.4

纯度：抗原亲和纯化级

储存与稳定性

参数 | 条件

储存温度 | 2 – 8 °C

有效期 | 收货之日起1年

缓冲液 | Tris缓冲盐水，含0.1% BSA和0.09%叠氮化钠

注意事项：叠氮化钠作为防腐剂，可能干扰细胞培养或体内注射实验。如需进行此类应用，请通过透析或超滤去除。

应用与方法参数

推荐工作浓度

应用 | 推荐稀释度

免疫组织化学（IHC） | 1:200 – 1:1000

免疫印迹（WB） | 1:2000 – 1:10000

免疫印迹（WB）操作要点

1. 封闭与稀释液：5% 脱脂牛奶-TBST

2. 一抗孵育：过夜孵育（推荐4°C）

3. 检测二抗：使用山羊抗兔IgG重轻链抗体（A120-101P）

免疫组织化学（IHC）操作要点

福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）切片：推荐使用pH 6.0的柠檬酸盐缓冲液进行抗原修复

稀释范围：1:200 – 1:1000，建议初次实验从1:500开始摸索最佳条件

检测系统：建议使用相应的HRP/AP标记的二抗及显色底物

靶点生物学功能

WDR5是属于WD重复蛋白家族的一员。WD重复结构由四个或更多重复单元组成，每个单元约40个氨基酸，以保守的色氨酸-天冬氨酸（WD）结尾。WD重复通常作为衔接蛋白的蛋白-蛋白相互作用位点，促进多蛋白复合物的组装。

结构与功能特征

WD重复数量：WDR5含有7个WD重复

核心复合物：是哺乳动物MLL和SET1组蛋白H3赖氨酸4（H3K4）甲基转移酶复合物的核心亚基

主要功能：协助MLL和SET1染色质修饰复合物的组装，是组蛋白甲基化调控的关键因子

别名

BIG-3（BMP2诱导的3 kb基因蛋白）

CFAP89（纤毛及鞭毛相关蛋白89）

SWD3（Set1c WD40重复蛋白同源物）

BMP2-induced 3-kb gene protein

质量保证

该抗体采用表位特异性亲和纯化工艺，针对人WDR5蛋白第50–100位残基之间的独特表位进行富集。该区域不与其他WD重复蛋白产生显著同源性，确保了高特异性。每批次产品均经过质控验证，符合研究用标准。

应用场景建议

1. 表观遗传学研究：利用WB或IHC检测WDR5在不同细胞类型或组织中的表达水平，分析其与MLL/SET1复合物其他亚基的共表达关系

2. 染色质免疫沉淀（ChIP）：配合特异性二抗可用于ChIP实验，研究WDR5在基因组特定区域的富集情况

3. 蛋白相互作用分析：通过免疫共沉淀（需自行验证IP适用性）研究WDR5与组蛋白甲基转移酶的相互作用

4. 发育与疾病模型：在大鼠、小鼠或人组织切片中进行IHC定位，探索WDR5在发育、干细胞维持及肿瘤发生中的分布变化

实验注意事项

物种交叉反应性：经验证对人、小鼠、大鼠均有效，其他物种需自行测试

抗原修复：IHC实验中强烈推荐使用柠檬酸盐缓冲液（pH 6.0）进行热诱导抗原修复，以提高染色信号

背景控制：多克隆抗体可能产生非特异性染色，建议设置同型对照或免疫前血清对照

抗体稀释液：WB实验中使用5%脱脂牛奶-TBST可获得较低的背景；IHC实验中可尝试含BSA的PBS以降低组织背景

*本产品仅供研究使用，不用于诊断程序。