产品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊抗兔IgG重链和轻链抗体(货号:A120-201P)是一款经交叉吸附和抗原亲和层析纯化的多克隆二抗。该抗体可识别兔IgG的完整分子,包括重链和轻链,适用于ELISA、免疫细胞化学(ICC)、免疫组织化学(IHC)和免疫印迹(WB)等多种检测平台。浓度为0.5 mg/ml,以PBS缓冲液配制,含0.09%叠氮化钠作为防腐剂。
技术参数
参数 | 详细信息
靶点 | 兔IgG重链和轻链
反应种属 | 兔
宿主 | 山羊
克隆性 | 多克隆
抗体形式 | 完整IgG
亚型 | IgG
标记 | 非偶联(未 conjugated)
纯化方式 | 抗原亲和纯化
抗原种属 | 兔
浓度 | 0.5 mg/ml
储存温度 | 2 – 8 °C
有效期 | 收货之日起2年
缓冲液 | 磷酸盐缓冲液(PBS),含0.09%叠氮化钠
特异性与交叉反应性
目标识别
该抗体通过免疫电泳和ELISA验证,与兔IgG重链和轻链均有反应。
同时识别其他兔免疫球蛋白(如IgA、IgM)所共有的轻链,因此适用于检测所有含有κ或λ轻链的兔抗体分子。
非特异性排除
未检测到针对兔非免疫球蛋白血清蛋白的抗体,背景风险低。
交叉反应水平
与牛、鸡、马、人、小鼠、猪和大鼠IgG的交叉反应率均低于1%,表明交叉吸附工艺有效。
注意事项:该抗体仍可能与其他未测试物种(如非人灵长类、狗、猫等)的IgG发生交叉反应,使用前建议自行验证。
应用与推荐稀释度
注意:并非所有列出的应用均经过生产实验室的直接测试。以下稀释度为起始参考范围,用户需根据具体实验体系进行优化。
应用 | 推荐稀释范围 | 备注
ELISA | 1:1000 – 1:20,000 | 作为检测抗体
ELISA(包被用) | 1:50 – 1:250 | 将抗体直接包被于微孔板时使用
免疫细胞化学(ICC) | 1:100 – 1:1000 | 需配合荧光或酶标记的二抗检测系统
免疫组织化学(IHC) | 1:100 – 1:1000 | 适用于福尔马林固定、冷冻切片等
免疫印迹(WB) | 1:1000 – 1:20,000 | 转膜后作为检测抗体
产品类型说明
该抗体为抗重链和轻链(H+L)类型,与完整IgG分子反应,并识别轻链。其优势在于可以检测到一抗的完整分子,灵敏度高;潜在劣势是可能与一抗的轻链发生非预期结合(例如在IP-WB实验中,若一抗变性后产生轻链片段,会被本抗体识别)。此外,由于经过了多物种交叉吸附,背景显著降低,适用于包含多种物种样本的多重检测。
储存与稳定性
储存条件:2–8°C,切勿冷冻。冷冻会导致抗体聚集和活性丧失。
有效期:自收货之日起2年,在未受污染且按推荐条件储存的情况下。
防腐剂:0.09%叠氮化钠。注意:叠氮化钠会抑制过氧化物酶活性,若需使用HRP标记的三抗进行检测,请在实验前通过透析或超滤去除本抗体中的叠氮化钠;若仅作为一抗使用(后续用标记三抗检测),则叠氮化钠不影响,因为经多次洗涤后残留量极低。
使用注意事项
1. 未直接标记:本产品为非偶联形式,必须配合酶标或荧光标记的抗山羊IgG二抗(如兔抗山羊、驴抗山羊)使用。
2. 物种交叉反应:虽然已吸附7种常见物种,但对其他物种(如豚鼠、仓鼠、猴等)的IgG仍可能存在一定交叉反应,建议设置适当的阴性对照。
3. 避免反复取用:建议分装保存于无菌容器中,避免反复开盖造成污染或降解。
4. 叠氮化钠毒性:请注意叠氮化钠为有毒物质,操作时佩戴手套,按危险化学品处理。
典型应用场景
免疫印迹信号放大:使用兔来源的一抗(1:1000)检测目标蛋白,随后用本抗体(1:5000)孵育,再以HRP标记的抗山羊IgG检测化学发光信号。
ELISA体系建立:在开发兔抗体滴度测定试剂盒时,本抗体作为通用的检测二抗,与HRP标记的三抗联用。
免疫组化双标:配合不同种属的一抗(例如小鼠抗A蛋白 + 兔抗B蛋白),使用本抗体(非标记)加上三抗体系检测兔来源的一抗,另一通道使用直接标记的抗小鼠二抗。
总结
本山羊抗兔IgG(H+L)抗体经过严格的交叉吸附和亲和纯化,在保持高灵敏度的同时大幅降低了与非目标物种的交叉反应,是人、小鼠、大鼠等常见模型体系中检测兔源一抗的可靠工具。其0.5 mg/ml的浓度和2年货架期,配合ELISA、WB、IHC和ICC的宽泛稀释范围,可满足常规至高通量检测需求。用户首次使用时,建议针对具体实验进行稀释度的梯度优化。
*本产品仅供研究使用,不用于诊断程序

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