兔抗KSRP抗体亲和纯化，解锁KSRP多维度转录后功能

产品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的KSRP抗体（货号A302-021A）是一款针对人源KH型剪接调控蛋白（KSRP）的兔多克隆抗体，经抗原亲和纯化，以未偶联完整IgG形式提供。该抗体可识别小鼠及人类样本中的KSRP蛋白，适用于免疫印迹、免疫沉淀及免疫组织化学检测，为RNA降解、剪接调控及炎症反应研究提供可靠工具。

核心规格参数

参数 详细信息

靶标 KSRP（KH型剪接调控蛋白）

反应性 小鼠、人类

宿主 兔

克隆性 多克隆

免疫原 第125–175位氨基酸区域

抗体形式 完整IgG

同型 IgG

偶联物 未偶联

纯度 抗原亲和纯化

抗原种属 人类

浓度 200 ?g/ml

缓冲液 Tris缓冲盐水，含0.1% BSA及0.09%叠氮化钠

储存条件 2–8 °C

保质期 到货后1年

免疫原与特异性验证

A302-021A抗体采用固相载体上固定的KSRP特异性表位进行亲和纯化。该抗体识别的表位位于人KSRP蛋白的第100至150位氨基酸之间（参考编号Q92945.3，GeneID 8570）。免疫球蛋白浓度依据比尔定律测定：1 mg/mL IgG在A280波长处的吸光度为1.4。

应用方法与推荐工作浓度

免疫印迹（WB）

推荐稀释范围：1:2,000 – 1:10,000

实验方案要点：

封闭液及抗体稀释液：含5%脱脂牛奶的TBST

一抗孵育条件：4°C孵育过夜（推荐）

细胞裂解液检测：使用山羊抗兔IgG重链+轻链抗体（货号A120-101P）作为二抗

免疫沉淀物检测：使用兔IgG轻链特异性HRP二抗，并在封闭缓冲液中添加5%正常猪血清（货号S100-020）以降低背景

> 功能性提示：KSRP在多种细胞中普遍表达，推荐起始稀释度为1:2000。使用蛋白酶体抑制剂（如MG132）处理可观察KSRP水平变化。

免疫沉淀（IP）

推荐用量：6 ?g 抗体 / mg 细胞裂解物

操作注意事项：

裂解缓冲液推荐使用含150–300 mM NaCl的非变性裂解液（如NP-40或Triton X-100缓冲液），以保留KSRP与RNA及蛋白的相互作用

裂解液中必须添加RNase抑制剂（如RiboLock）以保护RNA-蛋白复合物，同时添加蛋白酶抑制剂

抗体与裂解物共孵育：4°C旋转孵育2小时至过夜

使用Protein A/G磁珠或琼脂糖珠捕获免疫复合物

洗脱后建议使用轻链特异性二抗进行WB检测，避免重链信号干扰

复合物共沉淀：KSRP可与多种mRNA及microRNA加工复合物（如Dicer、TRBP）相互作用，IP产物可用于RNA免疫沉淀（RIP）或CLIP-seq研究。

免疫组织化学（IHC）

推荐稀释范围：1:200 – 1:1,000

抗原修复条件：

对于福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）组织切片，推荐使用pH 6.0的柠檬酸盐缓冲液或pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行热诱导抗原修复（两种方案均可，可根据组织类型优化选择）

染色步骤建议：

1. 脱蜡、水化后，使用3% H?O?封闭内源过氧化物酶

2. 热诱导抗原修复（微波或高压锅加热至沸腾，维持10–20分钟）

3. 室温冷却，正常血清封闭30分钟

4. 一抗4°C孵育过夜（推荐起始稀释度1:500）

5. HRP标记二抗及DAB显色，苏木精复染

组织表达谱：KSRP在脑、脾、肺、肝等多种组织中表达，定位于细胞核及细胞质（部分亚型）。

储存与稳定性指南

储存温度：2–8°C，请勿冷冻。反复冻融会导致抗体聚集及活性下降。

防腐剂：0.09%叠氮化钠，可抑制微生物生长。若用于涉及活细胞或RNA完整性实验，需透析去除。

稳定剂：0.1% BSA，降低非特异性吸附。

有效期：自到货之日起1年。