兔抗HCF1抗体亲和纯化，特异性识别转录共调解因子

产品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的HCF1抗体（货号A301-399A）是一种兔源多克隆抗体，特异性靶向人源宿主细胞因子1（Host Cell Factor 1，HCF1）。该抗体以全IgG形式提供，浓度为200 ?g/ml，经抗原亲和纯化，未偶联标记物，适用于免疫沉淀（IP）和Western Blot（WB）检测。

免疫原与特异性

本抗体的免疫原对应人源HCF1蛋白第1700至1750位氨基酸残基之间的区域，参考序列号为NP_005325.2（GeneID 3054）。通过表位特异性亲和纯化工艺，将针对HCF1固定化表位的抗体从抗血清中分离纯化，确保高特异性识别目标抗原。

技术参数

参数 | 详细信息

靶标 | HCF1 (Host cell factor 1)

反应性 | 人

应用 | 免疫沉淀（IP）、Western Blot（WB）

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 全IgG

免疫原 | 第1700–1750位氨基酸区间

同型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原种属 | 人

浓度 | 200 ?g/ml

储存条件 | 2–8 °C

保质期 | 收货后1年

缓冲液 | Tris缓冲盐水，含0.1% BSA及0.09%叠氮化钠

浓度测定方法

免疫球蛋白浓度采用比尔定律测定，其中1 mg/ml IgG在280 nm波长下的吸光度（A280）为1.4。

Western Blot实验方案

推荐稀释度

1:2,000 – 1:10,000

实验条件

封闭及稀释液：5%脱脂牛奶-TBST

一抗孵育：过夜孵育（4°C）

二抗（细胞裂解液WB）：山羊抗兔IgG重链和轻链抗体（货号A120-101P）

二抗（免疫沉淀物WB）：使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，并在封闭缓冲液中加入5%正常猪血清（货号S100-020），以消除膜上IgG重链的干扰信号。

免疫沉淀实验方案

推荐用量：6 ?g抗体/mg细胞裂解物

靶点背景信息

蛋白功能

HCF1最初被发现是单纯疱疹病毒（HSV）利用的一种宿主细胞因子，用于促进病毒立即早期基因的转录。在正常细胞中，HCF1作为转录共调节因子发挥核心作用，参与组蛋白修饰和细胞周期进程调控。

HCF1是多种转录因子复合物的组成成分，例如与OCT1（POU2F1）和GABP等协同作用。通过其N端的β-propeller结构域和C端的纤维蛋白原相关结构域，HCF1能够募集组蛋白甲基转移酶（如SET1/COMPASS复合物）和组蛋白乙酰转移酶，从而表观遗传调控基因表达。此外，HCF1在细胞周期G1/S转变过程中发生蛋白酶体介导的加工，产生多肽片段，这些片段仍保留功能并参与调控细胞增殖。

别称

C1 factor、CFF、HCF、HCF1、HCF-1、HFC1、host cell factor 1、MRX3、PPP1R89（protein phosphatase 1, regulatory subunit 89）、VCAF、VP16 accessory protein、VP16-accessory protein

产品优势与功能特点

1. 双重应用验证：同时适用于免疫沉淀和Western Blot检测，WB稀释范围宽广（1:2,000–1:10,000），IP推荐用量明确（6 ?g/mg裂解物），便于研究者直接使用，减少预实验工作量。

2. 高特异性亲和纯化：采用针对HCF1第1700–1750位表位的固相亲和纯化，有效去除非特异性血清蛋白和干扰抗体，降低背景信号，提高检测信噪比，尤其适用于内源性HCF1的IP-WB联用。

3. 稳定储存配方：缓冲液含0.1% BSA作为载体蛋白，防止抗体在低浓度下吸附损失；0.09%叠氮化钠作为防腐剂；Tris缓冲盐水维持生理性pH和离子强度。2–8°C下可稳定保存1年，无需冷冻，避免反复冻融导致的活性下降。

4. 精准定量：基于比尔定律（A280=1.4对应1 mg/ml IgG）进行浓度测定，确保不同批次间抗体浓度的一致性，提升实验结果的可重复性。

5. IP-WB联用优化设计：本抗体配套提供针对免疫沉淀后Western Blot的二抗选择建议——使用抗兔IgG轻链HRP抗体并添加5%正常猪血清封闭，可有效避免IP洗脱液中IgG重链（约55 kDa）对目标蛋白检测信号的遮挡，尤其当HCF1分子量较大（约210 kDa）时，重链干扰虽不明显，但轻链专用二抗仍能提升条带清晰度。